1-甲基假尿苷-5′-三磷酸是一种碱基修饰的核苷酸,用于合成免疫原性降低、稳定性提高的mRNA。是在N1位置进行甲基修饰的假尿苷衍生物,这是一种在18S rRNA 和许多生物体中的tRNA中发现的天然修饰。研究发现用N1-甲基假尿苷完全替代尿苷比用假尿苷更能降低mRNA的免疫原性,且更进一步增强mRNA的蛋白表达能力。
N1-甲基-假尿苷修饰mRNA降低免疫原性可能存3种机制,这些机制尚未完全阐明,可能是通过其中一种或多种机制联合作用。
1、减少反义RNA链合成:在高产量合成条件下,T7RNA聚合酶有时会以合成出来的RNA为模板,合成出少量的反义RNA链,从而形成dsRNA,这些dsRNA在体内具有很强的免疫原性。研究发现使用N1-甲基-假尿苷修饰能够合成mRNA可以减少dsRNA副产物的形成。
2、改变mRNA二级机构:除反义mRNA链杂质,mRNA还会形成能够被TLR3识别的二级结构。含有N1-甲基-假尿嘧啶的mRNA与非修饰的mRNA具有不同的二级结构,具有减弱外源mRNA放大RIG-I免疫信号途径的功能。因此使用N1-甲基-假尿苷修饰可能会改变mRNA二级结构或蛋白/mRNA二级结构相互作用,减弱识别事件。
3、 改变与单链mRNA识别受体的相互作用:在免疫细胞中,单链多聚尿嘧啶核苷酸能够被TLR7识别,是免疫细胞合成干扰素的最强诱导因子之一。研究发现即便在缺乏dsRNA识别信号途径的情况下,N1-甲基-假尿嘧啶修饰的mRNA依然要比非修饰mRNA具有更弱的免疫原性。说明N1-甲基-假尿嘧啶可能存在空间位置呈现的位阻阻断了免疫识别受体和外源合成mRNA单链部分的相互作用。
mRNA药物的最终目的是在细胞内表达出治疗性蛋白。最初报道N1-甲基-假尿嘧修饰mRNA提升蛋白表达水平的研究发现部分原因是由于N1-甲基-假尿嘧啶修饰mRNA减弱TLR3的激活反应。后续研究表明N1-甲基-假尿嘧啶的插入可以提升附着在mRNA上多聚核糖体的丰度和尺寸,从而导致更多的翻译起始和更缓慢的延伸速度协同提升mRNA的半衰期,同时引发mRNA与核糖体更加富有成效的相互作用。
珲信生物是华东医药(股票代码:000963)旗下全资子公司,公司总部及生产基地位于杭州市,在上海市设有营销中心。公司专注于mRNA药物、体外诊断、细胞基因治疗等产业链上游核心原料,并致力于向全球客户提供GMP级质粒DNA、mRNA、抗体及重组蛋白药物等CDMO整体解决方案。核心原料包括常规/修饰NTPs、mRNA帽类似物、dNTPs等合成砌块,T7 RNA聚合酶、RNA酶抑制剂、热启动DNA聚合酶、MMLV反转录酶等高端生物酶以及GMP级细胞因子。珲信生物一直践行“成就客户,产品至上,雷厉风行,合作共赢”的企业价值观,向全球客户提供符合国际标准的上游原料,为生物药企提供从研发到商业化生产全流程一站式CDMO解决方案。
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珲信生物是华东医药(股票代码:000963)旗下全资子公司,公司总部及生产基地位于杭州市,在上海市设有营销中心。公司主营业务包括mRNA、细胞基因治疗(CGT)等产业链上游核心原料,以及GMP级细胞因子、重组蛋白和ADC药物等CDMO服务。公司致力于成为全球核酸药物原料的创新领导者,向全球客户提供符合国际标准的上游原料,同时致力于成为从研发到商业化产的一站式CDMO专业服务提供商。公司拥有近万人的专业化临床营销团队,具有丰富的商业化推广经验,可提供商业合作支持。