简要描述
Rhod-2三钠盐(Rhod-2 Trisodium Salt)是一种水溶性、较高亲和力的可见光激发的钙离子荧光探针。类似于Fluo-3或Fluo-4,其激发和发射光谱不会随着Ca2+浓度变化发生明显的迁移,荧光信号一旦与Ca2+结合后会增强,Ex/Em=549/578 nm。Rhod-2三钠盐不具细胞膜渗透性,可通过微注射或划痕标记加载进入细胞。
参数信息
英文名称:Rhod-2 Trisodium Salt
中文名称:Rhod-2三钠盐
分子式:C40H39N4Na3O11
分子量:820.73
状态:暗红色固体
Kd(Ca2+结合):570NM
Ex/Em:549/578
溶解性:溶于水
纯度:≥95%
储存条件:-20℃避光干燥
使用方法与注意事项
【溶解与配置】:
推荐用纯水溶解,配制成储存液(如1-5 mM)后分装保存。
实验时需添加0.04% Pluronic F-127(防止探针聚集)和有机阴离子转运抑制剂(如丙磺舒,0.5-1 mM)以提高加载效率。
【加载步骤】:
去除细胞培养基中的血清和酚红(避免干扰自荧光)。
用缓冲液(如HHBS)洗涤细胞后,加入Rhod-2 Trisodium Salt工作液(终浓度4-5 μM)。
37℃孵育30-60分钟,再用缓冲液洗涤去除残留探针。
【检测设备】:
可用于激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪,需使用549 nm激发滤片和578 nm发射滤片。
【注意事项】:
- 储存条件:建议 - 20℃避光干燥保存,AM酯需防潮。
- 加载方法:钠盐需物理导入(如显微注射),避免酯酶抑制剂干扰。
- 信号校准:建议结合钙离子载体(如离子霉素)进行细胞内Ca²⁺浓度的定量分析。
关键字: Rhod-2三钠盐;Rhod-2 Trisodium Sal;
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