尿酸(UricAcid,UA)含量测定试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
UA是鸟类和爬行类动物的主要代谢产物,正常人体尿液中产物主要为尿素,含少量尿酸。此外,UA
还是重要的抗氧化剂,能清除超氧化物,羟自由基等。体内UA生成量和排泄量不平衡会导致多种疾病的
发生。例如,血中UA升高会引起痛风、肾功能损害和动脉硬化,相反UA降低会引起恶性贫血,在临床
诊断上具有重要的意义。
测定原理:
尿酸酶能催化UA生成尿囊素,CO2及H2O2,H2O2氧化亚铁氰化钾中的Fe2+生成Fe3+,Fe3+
进一步与酚和4-氨基安替比林缩合生成红色醌类化合物,在505nm下有特征吸收峰,测定反应体系505nm
的吸收值,可计算尿酸的含量。

试剂一:
A.用于标准管和测定管,粉剂1瓶,4℃避光保存,使用前加10ml缓冲液溶解。
B.用于空白管,粉剂1瓶,4℃避光保存,使用前加5ml缓冲液溶解。
试剂二:粉剂1瓶,4℃避光保存,使用前加10ml双蒸水水置于60℃加热溶解。
自备仪器和用品:
恒温水浴锅、可见分光光度计、1ml玻璃比色皿和蒸馏水。
样品的制备:
1、动植物组织:建议称取约0.1g组织,加入1ml生理盐水或蒸馏水,进行冰浴匀浆,然后8000g,4℃离
心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清,培养液:直接检测。


UA含量计算公式
1.组织:
(1)按样本重量计算
尿酸含量(μmol/g鲜重)=C标准品×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷(W÷V样总)
=0.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
尿酸含量(μmol/mgprot)=C标准品×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr=0.5×(A
测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr
(3)血清,培养液计算:
尿酸(μmol/L)=C标准品×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)×103
=500×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标:标准品浓度0.5μmol/ml;V样总:加入提取液体积,1ml;W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,
mg/ml;103:1μmol/L=103μmol/ml
注意事项
1.血清样本请在24小时内测定,或者4℃密封避光保存不超过72小时。
2.吸光值大于0.8可用蒸馏水稀释样本,并在计算公式中算入稀释倍数。
3.最低检出限为10μmol/L。
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