植酸(Saponin )含量试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
植酸又称肌酸、环己六醇六全-二氢磷酸盐,它主要存在于植物的种子、根干和茎中,其中以豆科植物 的种子、谷物的麸皮和胚芽中含量最高。植酸作为螯合剂、抗氧化剂、保鲜剂、水的软化剂、发酵促进剂、 金属防腐蚀剂等,广泛应用于食品、医药、油漆涂料、日用化工、金属加工、纺织工业、塑料工业及高分 子工业等行业领域。
测定原理:
磺基水杨酸-氯化铁溶液显紫红色,在 500nm 下有最大吸光值。在 pH6.0-6.5 的环境下,植酸和铁离子 结合使溶液颜色变淡,测定吸光度的降低来检测植酸含量。
需自备仪器和用品:
酶标仪、烘箱、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、金属震荡仪、蒸馏水
植酸提取:
样本烘干,粉碎过筛,称取 0.05g,加入 1ml 试剂一,震荡提取 2h;8000g,25℃离心 10min,取上清 0.5ml,加入 0.5ml 试剂二,混匀后 4℃静置 2h,离心取上清待测。
测定步骤:
1、酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 500nm。
2、测定管:取 100μl 上清,加入 900μl 试剂三,混匀后取 300μl 加入 96 孔板,再加入 100μl 试剂四,充分 混匀后,室温下静置 5min,后离心取上清 200ul,测定 500nm 下吸光值 A1。
3、空白液配制:取 0.5ml 试剂一和 0.5ml 试剂二混匀。
4、空白管:取 100μl 空白液,加入 900μl 试剂三,混匀后取 300μl 加入 96 孔板,再加入 100μl 试剂四,充 分混匀后,室温下静置 5min,后离心取上清 200ul,测定 500nm 下吸光值 A2。计算ΔA=A2-A1。 空白管只要做一管。
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