DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱

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【培养观察】

定期观察DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。

【细胞复苏】

复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。

【细胞传代】

传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。

【细胞冻存】

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。

【DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱英文别名】

DLD 1; DLD1; CoCL3

传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术，其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中，细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落，影响后续传代效率；而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明，细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟，具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面，当使用较高浓度（0.25%胰酶-EDTA）时，消化时间应缩短至1-2分钟；若使用较低浓度（0.05%），则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化，当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。

公司细胞系主要引进ATCC、DSMZ、JCRB、KCLB、RIKEN、ECACC等细胞库，细胞系体外培养，它们会成长为单层细胞，附着或紧贴在培养瓶上，或悬浮在体外的溶液中，细胞系复苏周期短，公司细胞系状态良好，饱满，有光泽等优点。EDTA的作用：许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白，胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于整联蛋白的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果5min还消化不下来的话)，而应该想其它办法。

【背景信息】

DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱DLD-１是１９７７-１９７９年间D.L.Dexter和同事分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。在AC和其它地方进行的DNAfingerprinting和染色体组型分析表明这株细胞与HCT-１５(CCL-２２５)相似，说明这两者是来自同一个人的不同克隆。他们的遗传起源可通过DNAfingerprinting证实，但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记一致改变或数目上一致改变。细胞的C阴性(C-)。DLD-１细胞的p５３抗原表达呈阳性(p５３抗原产生了一个C->

【传代比例】

1:2-1:4(DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)

【来源说明】

DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库

【生长特性】

DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长

【形态特性】

DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样

【换液周期】

DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次

【产品包装】

复苏发货：DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)

在培养细胞时，经常发现它们的状态不太理想，总是像一群顽皮的孩子般扎堆生长。用胰酶消化时，它们更是抱团取暖，形成一个个紧密的细胞团块，即使用移液管反复吹打也难以将它们分散成单个细胞。更令人困扰的是，它们的生长速度犹如雨后春笋，却极不均匀，传代第二天，某些区域就已拥挤得如同早高峰的地铁车厢。

细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，你可以尝试，准备100%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来，即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的，不要再去延长消化时间，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞：润洗方法5min还不能消化，以结肠癌细胞为例，比如：HCT15、LS411和KM12细胞，胰酶消化，一般10 cm培养皿，一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。

【物种来源】

DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源

【培养条件】

37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。

【消化传代】

使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）

【污染防控】

严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。

【细胞状态】

传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。

【污染检测】

支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。

【细胞接收流程】

收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。

【操作规范】

在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。

【消化条件】

室温下用胰酶消化1-3分钟。

【生物安全等级】

1级。

【空泡现象】

在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。

【血清比例】

使用10%-20%的血清浓度有助于优化DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞低代次保种|STR图谱实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。

细胞传代步骤（二）：终止消化:当观察到大部分细胞已经脱落时，向培养皿中加入适量的完全培养基以终止胰蛋白酶的消化作用。细胞悬液转移与离心:用吸管轻轻吹打培养皿底部的细胞，使其形成均匀的细胞悬液。然后，将细胞悬液转移至无菌离心管中，以适当的转速(通常为800-1000rpm)离心3-5分钟。重悬与接种:离心后，轻轻倒掉上清液，用适量的完全培养基重悬细胞沉淀。根据实验需要，将细胞悬液按照适当的比例接种到新的培养皿或培养瓶中，置于37℃、5% CO2的培养箱中继续培养。

直接倒掉上清液能够提高操作效率，节省时间。但这种方式存在一定风险，直接倾倒时较难控制力度和角度，如果操作不慎，容易使细胞沉淀随着上清液一起流出，导致细胞损失，而且可能会因液体快速流下冲击细胞沉淀造成细胞的物理性损伤。在实际的细胞传代操作中，应根据细胞的特性、实验的要求以及个人的操作熟练程度来选择合适的上清液处理方式。对于新手或者处理珍贵细胞系时，建议优先采用移液枪吸走的方式，以保障细胞的活性和传代的成功率。而在积累了丰富经验且对实验条件有充分把握的情况下，可以根据具体情况灵活运用直接倒掉上清液的方法，在保证实验质量的同时提高工作效率。

WiDr/S Cells;背景说明：结肠癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：WERI-Rb1细胞、MDCK (NBL-2)细胞、Hs-343-T细胞

HTR-8/SV-neo Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：T24细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H1666_DA细胞

293F Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长；悬浮生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：NCIH1876细胞、T_T_细胞、MV4;11细胞

RAT2 Cells;背景说明：成纤维细胞；自发永生；Fischer ３４４;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Rat 2细胞、Walker256细胞、P31 FUJ细胞

MHCC-LM3 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞

HAP1 AFTPH (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)

HAP1 SHOX2 (-) 3 Cells(提供STR鉴定图谱)

GLC82 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCTC 929细胞、Panc5.04细胞、TE-8细胞

GM17219 Cells;背景说明：B淋巴细胞；EBV转化;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞

SUNE1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：GM06141B细胞、NCIH1930细胞、NCIH446细胞

A2780CP70 Cells;背景说明：卵巢癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞

SHIN3 Cells;背景说明：卵巢浆液性囊腺癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HO8910PM细胞、H187细胞、PC 61细胞

Tca-8113 Cells;背景说明：舌鳞癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：KM12细胞、Hca-F细胞、NP-69细胞

H-524 Cells;背景说明：该细胞１９８２年建系，源自非小细胞肺癌男性患者的转移淋巴结。;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮生长;形态特性：圆形细胞;相关产品有：SRA01/04细胞、FC33细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞

MXI Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞

HyCyte MC-38 KO-mCasp8 Cells(提供STR鉴定图谱)

LCL-IDDM-PI450 Cells(提供STR鉴定图谱)

N52.F4 Cells(提供STR鉴定图谱)

OVNIS 5H Cells(提供STR鉴定图谱)

RTC-8T3 Cells(提供STR鉴定图谱)

Ubigene HeLa RB1CC1 KO Cells(提供STR鉴定图谱)

XP38OS Cells(提供STR鉴定图谱)

HeRo [Human Merkel cell carcinoma] Cells(提供STR鉴定图谱)

LTEPa2 Cells;背景说明：肺腺癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SNU-484细胞、PTK-1细胞、MADB106细胞

FBHE Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCI-H1781细胞、A2780/CP细胞、MHCC97L细胞

Ly18 Cells;背景说明：弥漫大B细胞淋巴瘤；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCIH28细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞

Ball 1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞;相关产品有：KM-H2细胞、HMEC1细胞、GM03569B细胞

GB1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞

GB1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞

Hs683T Cells;背景说明：该细胞源自７６岁白人男性的左颞叶侧胶质瘤组织，有微绒毛，无桥粒。 ;传代方法：１：４传代，每周换液２次;生长特性：贴壁生长;形态特性：成纤维细胞;相关产品有：H1836细胞、PBL细胞、HTori3细胞

NCI-BL2141 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：UO31细胞、H3255_DA细胞、HO8910/PM细胞

SK-OV-3 Cells;背景说明：SK-OV-３由G.Trempe和L.J.Old在１９７３年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到。 此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤，且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：WM-239-A细胞、TCMK1细胞、NCIH2405细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI Cells;背景说明：该细胞１９７３年由R. Cailleau建系，源自７４岁乳腺导管癌女性患者的胸腔积液，细胞生长缓慢，松散贴壁，生长过程中会脱落到培养基，不会汇合，过表达FGF受体;传代方法：１：２—１：４传代，每周换液２—３次;生长特性：松散贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞

GA-10 clone 4 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：每２-３天换液;生长特性：悬浮生长 ;形态特性：淋巴母细胞样;相关产品有：P388.D1细胞、Hs 636 T细胞、SNU-869细胞

GDM1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：２-３天换液１次。;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞样　;相关产品有：Jurkat-FHCRC细胞、WPMY-1细胞、MKN-1细胞

Mono-Mac-1 Cells;背景说明：急性单核细胞白血病；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：ssMCF7细胞、ATC241细胞、Normal Rat Kidney细胞

NCI-H498 Cells;背景说明：结肠腺癌；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：半贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞

VK2/E6E7 Cells人阴道上皮细胞|有STR图谱

NCI-H508 Cells人结肠直肠腺癌细胞|有STR图谱

NCTC 1469 Cells小鼠正常肝细胞|有STR图谱

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MM.1S+luc Cells人多发性骨髓瘤细胞|有STR图谱

MDA-MB-361 Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱

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NTERA-2 Cells人恶性多发性畸胎瘤细胞|有STR图谱

HCC1187 Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱

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