甲基绿染色液（0.1%）

    甲基绿染色液(0.1%)

简介：

甲基绿，化学式为C27H35BrClN3·ZnCl2，分子量为608.78，是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末。溶于水，显蓝绿色。稍溶于乙醇，不溶于戊醇。其是一种碱性染料，它易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色，又称双绿SF。

甲基绿染色液(0.1%)在组织或细胞染色中对细胞核进行染色，常用于鉴定DNA，细胞核中的DNA遇甲基绿会被染成蓝绿色，亦可用于免疫荧光染色或免疫组化染色。本品仅用于科研实验，不可做他用。

组成：

储存条件：

常温避光保存，一年有效

自备材料：

1、4%多聚甲醛

2、蒸馏水

3、系列乙醇

操作步骤（仅供参考）：

1、样品处理    

a)对于石蜡切片：    

二甲苯中脱蜡。    

更换新鲜的二甲苯，再脱蜡5～10 min。    

无水乙醇5 min。    

乙醇2 min。    

乙醇2 min。    

蒸馏水2 min。    

b)对于冰冻切片：    

蒸馏水2 min。

c)对于培养细胞：

用多聚甲醛固定10 min以上。

蒸馏水洗涤2 min。

更换新鲜的蒸馏水，再洗涤2 min。

2、甲基绿染色

a)    对于上述处理好的样本，用Methyl Green Stain(1%)染色5～10 min。

b)用蒸馏水冲洗2次，此时样本呈蓝色。

c)乙醇处理5 s。

d)用乙醇洗涤2次，直接观察或按下列组织切片操作步骤进行。

3、组织切片染色

a)乙醇脱水2 min。

b)更换新鲜的乙醇再脱水2 min。

c)二甲苯透明5 min。

d)二甲苯透明5 min。

e)中性树胶或其它封片剂封片。

f)显微镜下观察，细胞核呈绿色或蓝绿色。

4、荧光染色

a)如果进行免疫荧光染色，在甲基绿染色液染色后，乙醇洗涤2 次，每次2 min。

b)乙醇脱水2 min。

c)PBS或生理盐水或TBS等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5 min。

d)进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。

染色结果：

注意事项：

1、 首次使用本染液时建议先取1~2个样品做预实验。

2、 甲基绿染色可以根据染色结果和要求调整时间。

3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。