重组牛肠激酶

概述(Summary)icon 储存条件(Storage) 储存于 -20°C,保质期 12 个月 状态(Form) Liquid 储存溶液(Buffer) 50 mM Tris-HCl, 50%Glycerol, pH 8.0 分子量 26.2kDa 纯度 >95% as determined by SDS-PAGE quantitative densitometry by Coomassie Blue Staining. 比活性 >30 KU/mg,即 1mg 重组牛肠激酶至少可以酶切 1.5g 融合蛋白。 酶活单位定义 在 25℃,反应缓冲液为 50mM Tris-HCl ( PH 8.0 ),16 小时内酶切 50ug含有酶切位点的融合蛋白所需的酶量定义为1个酶活力单位,即1U。 酶切反应条件 25℃酶切 16 小时 标签 C-terminal His Tag 使用方法(Standard Operating Procedure)icon 1.使用过程中需要注意的问题:(1)当样品中含有某些成分时会影响酶的活性,如 >2 M Urea、>250 mM NaCl、>20 mM β-ME、>0.1% SDS、>50 mM Imidazol 需要透析至 50 mM Tris-HCl (pH 8.0); (2)磷酸盐会抑制肠激酶的活性,应避免使用磷酸盐缓冲液作为酶切体系; (3)溶解后放置在冰浴上尽量立即使用; (4)若一次性用不完,请在使用前配制成母液并分装成小规格(保证一次试验的用量)保存在-65℃,避免反复冻融影响蛋白 活性; (5)避免使用强酸、强碱、强氧化剂、高浓度的有机溶剂等易引起蛋白质变性的试剂。