细胞属性:
产品名称 | NCIH2444人非小细胞肺癌细胞 | 英文名称 | NCIH2444:NCIH2444 |
XG-X6950 | XG-X6950 | 规格 | 1×106 |
组织来源 | 肺 | 形态 | 贴壁生长 上皮细胞样 |
细胞特性
种属来源:人
性别年龄:男性,未知
组织来源:肺
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管
培养条件:RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2
冻存条件:90% FBS + 10% DMSO
传代方法:1:3-1:4传代, 2-3天传1代
1. 核心生物学特性
分子病理特征
组织来源:源自肺腺癌患者的原发肿瘤组织,病理分型为 实体型腺癌伴肉瘤样分化(含上皮-间质双向标记)
驱动变异:
ALK融合阳性(EML4-ALK variant 3a),伴TP53 R249S共突变
独特基因型:CDKN2A/B缺失(导致细胞周期调控异常)
功能特性:
高表达PD-L1(TPS 40-60%)和CXCL12(SDF-1)
干细胞特性:CD44+ALDH1A1+亚群占比10-15%
2. 核心研究价值
转化医学应用
靶向治疗模型:
ALK抑制剂(如洛拉替尼)敏感性测试(IC50 1-3nM)
耐药机制:可诱导ALK G1202R或EGFR旁路激活
免疫微环境研究:
与癌症相关成纤维细胞(CAFs)共培养促进CXCL12分泌
适用于抗PD-1/抗CXCR4联合治疗评估
技术适配性
单细胞分析:已建立scRNA-seq追踪ALK融合克隆演化
类器官培养:3D Matrigel中形成实性球体(需添加10μM Y-27632)
3. 培养体系优化
定制化培养方案
基础培养基:
DMEM/F12 (3:1) + 10% 特级胎牛血清(需预筛选支持ALK信号)
关键添加物:
- 重组人EGF(10ng/mL)
- 胰岛素(5μg/mL)
- A83-01(1μM,抑制自发分化)
特殊条件:
传代时保留条件培养基(比例1:1)
建议使用胶原IV包被培养瓶
质控标准
检测项 方法 合格阈值
ALK融合稳定性 RT-ddPCR(V3a) 融合转录本≥85%
支原体污染 PCR-电泳双验证 条带阴性
细胞活力 Calcein-AM/PI双染 存活率>90%
4. 常见问题解决方案
问题:洛拉替尼敏感性下降
→ 优化:冻存早期代次(P10前),避免长期培养导致遗传漂变
问题:类器官形成率低
→ 调整:Matrigel浓度提升至70%,补充FGF2(25ng/mL)

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关键字: 人非小细胞肺癌细胞;NCIH2444;NCIH2444:NCIH2444;
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