检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。预包被抗小鼠CLU抗体的酶标板与样本或标准品中的CLU结合后,依次加入生物素化检测抗体、辣根过氧化物酶标记的亲和素(SA/HRP复合物),形成免疫复合物。经洗涤去除游离成分后,加入TMB显色底物,在酶催化下显蓝色,终止反应后转为黄色。通过450 nm波长测定吸光度(OD值),CLU浓度与OD值呈正比,标准曲线法计算样本浓度。

试剂盒组分(以96T规格为例)

| 组分名称 | 规格/数量 | 保存条件 |
| 预包被酶标板 | 8×12孔 | 4℃ |
| CLU标准品 | 1支(冻干粉) | -20℃ |
| 标准品/样品稀释液 | 15 mL | 4℃ |
| 生物素化检测抗体 | 120 μL(100×) | 4℃ |
| 检测抗体稀释液 | 12 mL | 4℃ |
| SA/HRP复合物(SABC) | 12 mL | 4℃ |
| TMB显色液(A/B组分) | 各6 mL | 4℃(避光)|
| 终止液 | 12 mL | 室温 |
| 20×浓缩洗涤液 | 60 mL | 室温 |
| 封板胶纸 | 4张 | 室温 |
性能参数

检测范围:1.56–100 ng/mL(微量法)或18.7–1200 ng/mL(常规法)。
灵敏度:最低检测限为0.41 ng/mL(微量法)或6.1 ng/mL(常规法)。
样本类型:血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、培养上清等生物液体。
反应时间:约3.5小时(含孵育与显色步骤)。
操作步骤概要

标准品复溶:用稀释液溶解冻干标准品,梯度稀释至所需浓度。
加样与孵育:将样本或标准品加入酶标板,37℃孵育1小时。
洗涤:用1×洗涤液洗板3次。
检测抗体孵育:加入生物素化抗体,37℃孵育30分钟。
SA/HRP复合物结合:加入SABC,37℃孵育30分钟。
显色与终止:加入TMB避光显色15分钟,终止反应后读数。
注意事项

避免反复冻融样本或标准品。
洗涤需彻底,防止非特异性结合。
试剂盒组分可能存在差异,请以实际货号说明书为准。
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