小鼠补体成分4(C4)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中的补体成分C4含量。试剂盒具有高灵敏度、特异性和重复性，适用于科研实验。

技术参数

检测范围：0.5–16 μmol/L。

灵敏度：最低检测浓度＜0.1 μmol/L。

特异性：不与小鼠其他补体成分或类似物交叉反应。

重复性：板内变异系数＜10%，板间变异系数＜15%。

反应时间：1–5小时（含温育步骤）。

检测波长：450 nm（需酶标仪支持）。

试剂盒组成

| 组分名称 | 96孔配置 | 48孔配置 |

| 预包被微孔板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 |

| 标准品（S0-S5） | 0.3 mL×6管 | 0.3 mL×6管 |

| HRP标记检测抗体 | 10 mL | 5 mL |

| 底物A/B | 各6 mL | 各3 mL |

| 终止液 | 6 mL | 3 mL |

| 20×洗涤缓冲液 | 25 mL | 15 mL |

注：标准品浓度梯度通常为0、25、50、100、200、400 pg/mL。

操作步骤

样本准备：样本需离心去除颗粒物，避免反复冻融。

加样：

标准品孔：加入50 μL不同浓度标准品。

样本孔：加入50 μL待测样本。

空白孔：仅加样本稀释液。

孵育：每孔加入100 μL HRP标记抗体，37℃避光孵育60分钟。

洗涤：弃液后拍干，每孔加满洗涤液（1×稀释），重复洗板5次。

显色：加入底物A/B各50 μL，37℃避光反应15分钟。

终止与检测：加入50 μL终止液，15分钟内测定450 nm处OD值。

注意事项

保存条件：2–8℃保存，避免冷冻或光照，有效期6个月。

样本类型：血清/血浆需避免溶血；组织样本需充分匀浆离心。

质量控制：建议每次实验设置复孔，标准曲线R²值应≥0.99。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

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