商品属性
产品名称
小鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒
英文名称
Mouse MMP-3 ELISA Kit
检测范围
0.3125ng/mL-10ng/mL
货号
PM33276
规格:48孔/96孔板
适用样本:血清、血浆、细胞培养上清液、尿液等生物体液
保存条件:2-8℃冷藏
检测原理
采用双抗体夹心ABC-ELISA法:
抗小鼠MMP-3单克隆抗体预包被于酶标板。
标准品或样本中的MMP-3与包被单抗结合,加入生物素化抗小鼠MMP-3抗体形成复合物。
辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)与生物素结合,加入底物后显色(蓝色)。
终止反应后,于450nm波长测定吸光度(OD值),MMP-3浓度与OD值呈正比,通过标准曲线计算样本浓度。
试剂盒组成
预包被酶标板(96孔)
酶标抗体工作液(HRP标记)
标准品(浓度梯度)
生物素化检测抗体
底物工作液(TMB等)
终止液(硫酸溶液)
洗涤缓冲液(浓缩液需稀释)
操作步骤概要
加样:标准品及样本加入对应孔位,孵育后洗涤。
加检测抗体:加入生物素化抗体,孵育后洗涤。
加酶结合物:加入HRP标记链霉亲和素,孵育后洗涤。
显色:加入底物工作液,避光反应后终止。
检测:450nm读取OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
结果分析
标准曲线绘制:以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标(需扣除空白孔背景值)。
样本浓度计算:根据OD值通过标准曲线拟合方程或软件(如Curve Expert 1.3/1.4)计算,稀释样本需乘以稀释倍数。
注意事项
复孔检测建议取平均值以提高准确性。
若样本OD值超出标准曲线范围,需适当稀释后重测。
避免反复冻融样本及试剂,操作时需佩戴防护用具。
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