商品属性
产品名称
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒
英文名称
Mouse IGFBP-1 ELISA Kit
检测范围
0.3125ng/mL-10ng/mL
货号
PM33279
检测原理
双抗体一步夹心法(酶联免疫吸附试验,ELISA)。
样本要求类型:血清、血浆、组织匀浆、尿液、脑脊液等;
体积:50-100μL。
试剂盒组成
微孔酶标板(96孔/48孔);
标准品(浓度梯度);
检测抗体-HRP、底物(A/B)、终止液;
洗涤缓冲液(需稀释)、封板膜、说明书。
保存与有效期
保存温度:2-8℃;
有效期:6个月(未开封)。
操作步骤概要:
准备:试剂平衡至室温,稀释标准品与样本(如需),配制洗涤液。
加样:向微孔中加入标准品及已处理的待测样本。通常设置复孔。
温育:封板,在37°C孵育。
洗涤:倒掉孔内液体,用洗涤液洗板,甩干。
加检测抗体:每孔加入酶标检测抗体。
二次温育:封板,再次37°C孵育。
洗涤:同上。
加底物:每孔加入TMB底物液。
避光显色:室温避光孵育(时间按说明书,如15-30分钟)。
加终止液:每孔加入终止液终止反应。
读数:立即(通常在30分钟内)用酶标仪在450nm处测量各孔OD值。可设置参考波长(如630nm)扣除非特异性背景。
结果计算:
计算每个标准品和样本的平均OD值(减去空白孔值,如有)。
以标准品浓度为横坐标(X轴),对应的平均OD值为纵坐标(Y轴),绘制标准曲线。线性最好使用四参数Logistic曲线拟合(4PL)。
根据样本的平均OD值,利用标准曲线计算其对应的IL-5浓度。
若样本被稀释过,需乘以稀释倍数得到最终浓度。
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上海博湖生物科技有限公司
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