商品属性
产品名称 | 小鼠白细胞介素17A(IL-17A)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse IL-17A ELISA Kit |
检测范围 | 7.8125pg/mL-500pg/mL | 货号 | PM33317 |
基本原理
检测方法:双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (Sandwich ELISA)。
流程:
微孔板预先包被抗小鼠IL-17A的单克隆抗体(捕获抗体)。
加入待测样本(如血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆)和小鼠IL-17A标准品。
加入生物素或HRP标记的抗小鼠IL-17A的另一株单克隆抗体(检测抗体)。
温育后彻底洗涤。
加入底物(通常为TMB)。
酶催化底物显色(无色→蓝色→加酸终止后变为黄色)。
颜色深浅与样本中IL-17A的浓度呈正相关。
检测与计算:在450nm波长下读取吸光度(OD值)。根据标准品浓度和对应的OD值绘制标准曲线,利用曲线方程计算样品中IL-17A的浓度。

样品收集、处理及保存
血清: 用无热原、无内毒素的采血管收集血液,避免溶血或剧烈震荡。室温凝固后,1000 - 3000×g 离心10-20分钟,小心分离上层澄清血清。
血浆: 使用EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂收集血液。采血后30分钟内于1000 - 3000×g 离心10-30分钟取上清(血浆)。
细胞培养上清: 收集细胞培养液,立即1000 - 3000×g 离心10-20分钟去除细胞及碎片,取上清。
组织匀浆: 将组织剪碎,加入适量预冷的PBS(或其他特定提取缓冲液),用匀浆器或超声处理制成匀浆。10000×g左右离心10-20分钟,取上清液。
保存:
新鲜制备的样品最好立即检测。
如需短期保存,可置于2-8℃冷藏(通常建议不超过48小时)。
如需长期保存,应分装后冻存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。检测前需恢复至室温并完全融化后,再次离心去除沉淀。
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