大鼠干扰素γ诱导单核因子(MIg)ELISA试剂盒

商品属性

用途

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆或细胞上清液中的大鼠干扰素γ诱导单核因子(MIg)含量，仅限科学研究使用，不可用于临床诊断。

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。预先包被抗大鼠干扰素γ诱导单核因子抗体的微孔板中依次加入待测样本、标准品及辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经洗涤后，加入底物TMB显色，在过氧化物酶催化下生成蓝色产物，酸化后转为黄色。颜色深度与样本中γ浓度呈正比，通过450 nm波长测定吸光度（OD值），依据标准曲线计算浓度。

样本要求

血清：采集血液后静置30分钟，3000 rpm离心10分钟，分离血清。

血浆：使用肝素或EDTA抗凝管收集血液，离心后取上清。

细胞上清：离心去除颗粒物，避免反复冻融。

样本需在-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

试剂盒组成

预包被微孔板

γ标准品

HRP标记检测抗体

TMB显色液

终止液

洗涤缓冲液（浓缩）

封板膜

说明书

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：每孔加入样本或标准品50 μL，37℃孵育30分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液洗板5次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体50 μL，37℃孵育30分钟。

显色：洗涤后加TMB底物50 μL，避光反应15分钟。

终止：加入终止液50 μL，立即测定OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度。

注意事项

实验前需平衡所有试剂至室温（20-25℃）。

避免微孔板干燥或长时间暴露于强光。

不同批次试剂不可混用。

若样本浓度超出标准曲线范围，需适当稀释后复测。

技术参数

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL。

灵敏度：≤5 pg/mL。

特异性：不与大鼠其他细胞因子交叉反应。

储存条件

未开封试剂盒2-8℃保存，开封后根据组分要求存放（部分需-20℃避光保存）。

有效期

12个月（详见包装标签）。

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