产品名称
人白介素15(IL-15)ELISA试剂盒
英文名称
Human IL-15 ELISA Kit
分类
Human/人Elisa试剂盒
检测范围
31.25pg/mL-1000pg/mL
灵敏度
15.625pg/mL
货号
PH33189
规格:48T/96T
保存条件:2-8℃冷藏,避免冻融;有效期6个月。
检测原理
采用双抗体夹心法,通过包被抗人IL-15抗体捕获样本中的IL-15,再与辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体结合,经显色反应后测定450nm波长吸光度(OD值),计算目标蛋白浓度。
试剂盒组成
预包被微孔板(抗人IL-15抗体)
标准品(冻干或液体,浓度梯度:X pg/mL至X pg/mL)
样本稀释液(40×浓缩液或即用型)
HRP标记检测抗体
洗涤液(20×浓缩液,需稀释)
底物A/B(TMB显色液)
终止液(2M硫酸)
封板膜
操作步骤
平衡与准备
试剂盒室温平衡20-30分钟,标准品复溶后分装保存于-20℃。
加样
标准品孔:加入50μL不同浓度标准品。
样本孔:先加10μL待测样本,再加40μL稀释液(最终稀释倍数根据样本类型调整)。
空白孔:仅加稀释液。
孵育
每孔加入100μL HRP标记抗体(空白孔除外),37℃孵育60分钟。
洗涤
弃液后拍干,每孔加满洗涤液,静置1分钟,重复5次。
显色与终止
加底物A/B各50μL,37℃避光反应15分钟。
加入终止液50μL,反应终止后15分钟内测定OD450值。
计算与分析
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过曲线方程计算样本浓度。
注意事项
避免反复冻融样本或试剂。
实验需使用无菌耗材,避免微生物污染。
若样本浓度超出标准曲线范围,需进一步稀释后重测。
操作时需佩戴防护用具,终止液为强酸,避免接触皮肤。
性能参数
灵敏度:≤X pg/mL
检测范围:X-X pg/mL
精密度:板内/板间变异系数<10%。
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