异硫氰酸荧光素-辣根过氧化物酶/FITC-HRP/Fluorescein Isothiocyanate-Horseradish Peroxidase/ HRP-FITC/双标记酶-荧光探针(兼具催化与荧光信号)
FITC-HRP由两部分组成:FITC荧光基团和HRP酶蛋白。FITC是一种经典的绿色荧光染料,其最大激发波长约为490 nm,最大发射波长约为520 nm27。HRP是一种从辣根中提取的过氧化物酶,分子量约44 kDa,能催化过氧化氢分解并氧化底物产生显色或化学发光信号67。两者通常通过FITC的异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与HRP分子表面的赖氨酸残基氨基反应形成稳定的硫脲键连接16。该复合物的核心优势在于双重信号输出:荧光信号:FITC提供绿色荧光,适用于荧光显微镜、流式细胞术等直接成像检测23。酶催化信号:HRP可催化TMB、DAB等底物产生颜色变化或化学发光,实现信号放大,检测灵敏度可达pg级。.
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