半胱氨酸含量测定试剂盒 新品

半胱氨酸（Cys）含量测定试剂盒说明书

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                            

测定意义：

蛋白质含有三种含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中，Cys是唯一一种含有巯基的含硫氨基酸，从甲硫氨酸转化而来，并且可与胱氨酸互相转化。Cys参与蛋白质二硫键的形成，经常是蛋白质活性中心的组成部分，还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外，Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面，在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性，并且补充巯基，以维持皮肤的正常代谢，调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。

测定原理：

Cys还原磷钨酸生成钨蓝，在600nm处有吸收峰；通过600nm吸光度，计算Cys含量。

试剂三用前1天，向试剂三中加2.5ml蒸馏水充分溶解，再加85％磷酸0.625ml，混匀后盖紧（防止水分散失）沸水浴30min；冷却后加10ml蒸馏水，4℃可保存2周。

标准品临用前加10 ml蒸馏水，充分溶解。1μmol/ml标准液，4℃避光保存。用不完的试剂4℃可保存3天。

自备仪器和用品：

低温离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、85％磷酸和蒸馏水。

半胱氨酸提取：

1.液体样品中半胱氨酸提取：取0.1ml液体样品，加试剂一0.9ml，充分混匀，8000xg

4℃离心10min，取上清液，待测。

2.组织中半胱氨酸提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml试剂一）进行冰浴匀浆，8000xg 4℃离心10 min，取上清液待测。

3. 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000xg 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

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