商品属性:

产品名称 | 金黄色葡萄球菌检测试剂盒 | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1263 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
传统培养与鉴定法(基准方法)

这是最经典、最基本的方法,常被视为“金标准”,但通常不以单一试剂盒形式存在,而是一套流程和试剂组合。
原理:利用金黄色葡萄球菌的生物学特性,通过选择性培养基进行分离,再通过生化试验进行鉴定。
流程:
增菌培养:将样本接种于含高盐的肉汤中进行选择性增菌。
分离培养:转种到选择性平板(如Baird-Parker平板),典型菌落呈黑色、光滑、周围有浑浊带和透明圈。
鉴定确认:
coagulase Test(血浆凝固酶试验):这是鉴定致病性金黄色葡萄球菌的关键试验**。该菌能产生凝固酶,使兔或人血浆发生凝固。阳性结果通常视为有致病性。
DNA酶试验:金黄色葡萄球菌DNA酶阳性。
甘露醇发酵试验:金黄色葡萄球菌能发酵甘露醇产酸。
显色培养基:培养基中含有特异底物,金黄色葡萄球菌菌落呈现特定颜色(如粉红、绿色),便于快速初筛。
优点:是确证方法,可进一步进行药敏试验以指导临床用药。
缺点:流程繁琐,耗时长(通常需2-5天),对操作人员技术要求高。
2. 免疫学检测法(快速筛查)

这类方法以试剂盒形式出现,适用于快速筛查。
原理:利用抗原与抗体特异性结合的反应,检测样本中是否含有金黄色葡萄球菌的特异性抗原(如蛋白A、肠毒素等)。
常见类型:
乳胶凝集试剂盒:将针对金黄色葡萄球菌特异性抗原的抗体包被在乳胶颗粒上。当与待测菌落或样本混合时,若存在相应抗原,则会发生肉眼可见的凝集反应。非常快速(数秒至几分钟),常用于从平板上挑取可疑菌落后的快速鉴定。
免疫层析试纸条(侧向流免疫分析):类似早孕试纸。将样本滴加加样区,通过层析作用,若存在目标抗原,则会在检测线(T线)发生特异性结合而显色。操作简单,无需专业设备,适用于现场快速检测。
酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒:主要用于检测金黄色葡萄球菌肠毒素。灵敏度高,可实现批量样本的定量或半定量检测。
优点:速度快(10分钟至4小时),操作简便,适合基层单位或现场筛查。
缺点:灵敏度可能低于PCR法,可能存在交叉反应,一般不能区分活菌/死菌,也无法进行药敏试验。
3. 分子生物学检测法(荧光PCR法)

这是目前最先进、快速且灵敏的方法,已成为许多实验室的首选。
原理:通过聚合酶链式反应(PCR)技术,特异性扩增金黄色葡萄球菌独有的基因片段(如nuc基因、femB基因等)。荧光PCR(qPCR) 在反应体系中加入荧光探针或染料,可实时监测扩增过程,实现定性甚至定量检测。
流程:
DNA提取:从样本(菌落、样本增菌液等)中提取DNA。
PCR扩增:将DNA与含有引物、探针的PCR反应液混合,放入荧光PCR仪进行扩增。
结果判读:仪器软件自动分析荧光信号。若出现特定的S型扩增曲线,并给出Ct值,则判定为阳性。Ct值越小,代表起始模板量越多。
特殊应用:可设计特异性引物探针,在同一反应中同时检测金黄色葡萄球菌和mecA基因(介导甲氧西林耐药的基因),从而快速鉴定MRSA,对临床治疗至关重要。
优点:
超高灵敏度与特异性:可检测微量细菌。
快速:整个 process 可在2-4小时内完成。
能检测难培养或已使用抗生素的样本。
可同时检测耐药基因。
缺点:
设备昂贵,需要专业的分子生物学实验室。
对操作和防污染要求极高。
无法区分活菌和死菌(除非结合前处理技术如PMA染料)。
无法直接进行药敏试验。
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关键字: 金黄色葡萄球菌;检测试剂盒;荧光PCR法;
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