结核杆菌(TB)检测试剂盒(荧光PCR法)
简介:
结核杆菌(TB)检测试剂盒(荧光PCR法)是一种用于快速、灵敏检测结核杆菌核酸的分子生物学工具,广泛应用于临床诊断和流行病学调查。以下是该试剂盒的详细说明:
产品名称 | 结核杆菌(TB)检测试剂盒(荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1267 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
预期用途
定性检测临床样本中的结核杆菌核酸,适用于结核感染的辅助诊断。
检测原理
基于实时荧光定量PCR技术,针对结核杆菌的特异性基因序列(如IS6110插入序列或MPB64蛋白基因)设计特异性引物和TaqMan探针
在PCR扩增过程中,探针与目标序列结合,Taq聚合酶的5'-3'外切酶活性降解探针,释放荧光信号。通过实时监测荧光信号的强度变化,实现病毒核酸的定性检测。
主要组成成分
PCR反应液:含缓冲液、dNTPs等,用于支持PCR扩增反应。
酶液:含DNA聚合酶,催化核酸合成。
特异性引物和探针:针对结核杆菌基因组设计,探针标记荧光基团(如FAM)和淬灭基团,确保检测的特异性和灵敏度。
阳性质控品:含已知浓度的结核杆菌核酸,用于验证试剂盒的有效性和反应体系的正常工作。
阴性质控品:不含结核杆菌核酸,用于排除试剂污染或假阳性结果。
说明书:详细的操作步骤和注意事项。
样本类型
适用于痰液、血液、脑脊液、组织样本等多种临床样本类型。
检测步骤
样本处理:采集相关样本,提取DNA。
试剂准备:从冰箱中取出试剂盒,取出实验所需试剂,充分融化混匀并瞬时离心。
加样:将提取的DNA、阳性质控品和阴性质控品加入相应的PCR反应管中。
PCR扩增:将反应管置于荧光定量PCR仪中,设置适当的循环参数进行扩增和荧光信号采集。
结果分析:根据荧光信号的阈值循环数(Ct值)判断样本中是否存在结核杆菌核酸。Ct值越小,表示病毒核酸含量越高。
结果判读
阳性:Ct值≤40,且荧光扩增曲线有明显的指数增长期。
阴性:Ct值>40或无Ct值,荧光扩增曲线无明显增长。
质控标准要求阴性质控品无特异性扩增,阳性质控品Ct值≤32,否则实验视为无效。
储存条件及有效期
避光保存于-20℃以下,避免反复冻融,有效期通常为12个月。
注意事项
严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、PCR检测区),避免交叉污染。
使用一次性耗材,实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精处理工作台和仪器。
严格按照说明书操作,确保实验结果的准确性和可靠性。
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