季节性流感病毒 H3N2 亚型 HA 基因检测试剂盒
简介:
季节性流感病毒 H3N2 亚型 HA 基因检测试剂盒主要用于检测和鉴定流感病毒 H3N2 亚型的血凝素(HA)基因,广泛应用于临床诊断、流行病学监测和科研领域。以下是其详细说明及特点:
产品名称 | 季节性流感病毒 H3N2 亚型 HA 基因检测试剂盒 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1292 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
检测原理
基于实时荧光定量PCR技术,利用针对H3N2亚型HA基因保守区域设计的特异性引物和荧光探针,对样本中的病毒RNA进行逆转录和扩增。扩增过程中,荧光信号随目标基因拷贝数增加而增强,通过实时监测荧光信号变化实现定性或定量分析。
主要组成
逆转录及PCR反应液:含逆转录酶、RNA酶抑制剂、DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等,支持RNA逆转录和DNA扩增。
特异性引物和探针:探针标记荧光报告基团(如FAM)和淬灭基团,确保检测特异性。
阳性对照:含H3N2亚型流感病毒HA基因片段,用于验证试剂盒有效性和反应体系正常工作。
阴性对照:不含目标核酸的对照样本,用于排除试剂污染或假阳性结果。
核酸提取试剂(可选):用于从临床样本(如咽拭子、鼻拭子、痰液)中提取纯化病毒RNA。
检测步骤
样本采集与处理:采集患者咽拭子、鼻拭子或痰液样本,使用商业化核酸提取试剂盒提取总RNA。
逆转录与PCR扩增:将提取的RNA模板与逆转录及PCR反应液、特异性引物、探针混合,分装至PCR反应管或反应板中,置于荧光定量PCR仪中进行扩增,实时监测荧光信号变化。
结果分析:根据荧光曲线的Ct值(阈值循环数)或扩增终点荧光强度判断样本中是否含H3N2亚型流感病毒HA基因。
结果判定
阳性:样本中存在H3N2亚型流感病毒HA基因,荧光曲线呈现典型扩增特征,且Ct值低于设定阈值。
阴性:样本中未检测到H3N2亚型流感病毒HA基因,荧光信号无明显变化,或Ct值高于阈值。
无效:阳性对照未出现预期扩增曲线,或阴性对照出现异常信号,提示实验存在污染或试剂失效,需重新检测。
应用价值
临床诊断:快速确诊H3N2亚型流感病毒感染,辅助早期干预和治疗,尤其适用于流感季节的鉴别诊断。
流行病学调查:监测H3N2亚型流感病毒的流行趋势、传播特征及病毒变异情况,为公共卫生防控提供依据。
科研应用:用于研究H3N2亚型流感病毒的分子流行病学、致病机制及疫苗开发等。
特点
高灵敏度和特异性:针对H3N2亚型HA基因设计的特异性引物和探针,能够准确检测病毒核酸,减少假阳性和假阴性结果。
快速检测:实时荧光定量PCR技术能够在数小时内完成检测,快速获得结果,有助于临床及时诊断和治疗。
自动化程度高:可与自动化核酸提取仪和荧光定量PCR仪配套使用,适合大规模样本筛查,提高检测效率。
适用样本类型广泛:适用于咽拭子、鼻拭子、痰液等多种临床样本类型,样本采集和处理灵活。
定量与定性分析:不仅可以进行定性分析,还可以通过Ct值进行半定量分析,评估病毒载量。
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