商品属性:

急性肝胰腺坏死病(AHPND/EMS)病原检测试剂盒(PCR-荧光探针法)是一种用于快速、准确检测AHPND病原体的分子生物学工具。该试剂盒基于PCR技术和荧光探针原理,能够特异性识别和扩增AHPND病原体的DNA片段,从而实现对病原体的高效检测。
产品名称 | 急性肝胰腺坏死病(AHPND/EMS)病原检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1298 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
试剂盒原理:

利用PCR技术扩增AHPND病原体特异性DNA片段,结合荧光探针实时监测扩增过程,通过荧光信号强度判断样本中是否存在目标病原体DNA。
检测样本:
对虾组织样本(如肝胰腺、肌肉等)。
试剂盒组成(以常见配置为例):
PCR反应混合液:含缓冲液、dNTPs、Mg2?等PCR反应必需成分。
热启动DNA聚合酶:具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,用于DNA扩增。
特异性引物和探针:针对AHPND病原体设计,探针带有荧光报告基团和淬灭基团。
阳性对照:含已知浓度的AHPND病原体DNA,用于验证试剂盒有效性和反应体系正常工作。
阴性对照:无菌去离子水或不含目标DNA的样本,用于排除试剂污染和假阳性结果。
DNA提取试剂:用于从对虾组织样本中提取病毒核酸。
操作步骤:

样本采集与处理:采集对虾肝胰腺、肌肉等组织样本,进行研磨、匀浆等预处理。
核酸提取:使用试剂盒提供的提取试剂或自动化核酸提取仪,从样本中提取病毒DNA。
反应体系配置:在无菌条件下配置PCR反应体系,通常包括PCR反应混合液、热启动DNA聚合酶、特异性引物和探针、提取的DNA模板等。
荧光PCR扩增:将配置好的反应体系加入荧光定量PCR仪,设置扩增程序(包括预变性、循环扩增等步骤),并实时监测荧光信号。
结果分析:根据荧光信号的阈值循环数(Ct值)和扩增曲线形状判断样本中是否存在AHP以病原体DNA。通常Ct值越小,表示病毒载量越高。
注意事项:

严格遵守实验室生物安全规范,避免交叉污染。
操作过程中佩戴手套、口罩、实验服等个人防护装备。
试剂盒成分应按照说明书要求储存和使用,避免反复冻融。
定期维护和校准PCR仪器,确保检测结果准确可靠。
结果判读需结合临床症状和其他检测结果进行综合评估。
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关键字: 急性肝胰腺坏死病;检测试剂盒;PCR-荧光探针法;
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