硝酸还原酶(NR)测定试剂盒(NADH速率法)/微量法/96样
测定意义:
NR( EC 1.7.1.3 )广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。
测定原理:
NR 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3 - +NADH+H+ → NO2 - +NAD+ +H 2 O;NADH 在 340 nm 有最大吸收峰,通过测定 NADH 减少速率来表示 NR 活性。
自备仪器和用品:
酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水测定步骤:
1、酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 340nm。
2、样本测定
在 96 孔板中依次加入 10 μL 样本上清,75 μL 试剂一,90 μL 蒸馏水,最后加入 25 μL 试剂二。充分混匀后,记录 1min 时吸光值 A1 和 6min 时吸光值 A2,Δ A=A1-A2。
注 意:
1 、建议使用新鲜没有冷冻过的样本。
2 、一般不要诱导处理,预测定结果没有活性(ΔA≤0)则需要诱导处理。
上海酶联生物科技有限公司
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