霍乱弧菌 O1 检测试剂盒
试剂简介:
霍乱弧菌 O1 检测试剂盒用于快速、灵敏地检测霍乱弧菌 O1 群,适用于临床诊断和流行病学监测。
产品名称 | 霍乱弧菌 O1 检测试剂盒 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1323 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
检测原理
基于荧光 PCR 技术,针对霍乱弧菌 O1 群特异性基因(如 rfbO1)设计特异性引物和探针,通过实时荧光定量 PCR 扩增检测样本中的 O1 群霍乱弧菌核酸。
产品组成
PCR 反应液:含缓冲液、dNTPs、Mg2等 PCR 反应必需成分。
酶混合液:含高保真 DNA 聚合酶、逆转录酶等。
特异性引物和探针:针对 rfbO1 基因设计,探针标记荧光报告基团(如 FAM)和淬灭基团。
阳性对照:含已知浓度的 O1 群霍乱弧菌核酸。
阴性对照:不含目标基因,用于排除假阳性。
操作步骤
样品采集与处理:采集粪便、呕吐物或水样,提取总 DNA。
试剂配制:配制 PCR 反应混合液,包含反应液、酶液、引物和探针。
加样:将提取的核酸、阳性对照和阴性对照加入反应管中。
PCR 扩增:设置扩增程序(如 95℃ 预变性,随后进行 40 个循环的变性、退火和延伸),实时监测荧光信号。
结果分析:根据 Ct 值判断结果,阳性对照应有典型 S 型扩增曲线,阴性对照应无扩增曲线。
操作特点
高灵敏度和特异性:能够检测低浓度的 O1 群霍乱弧菌核酸,特异性引物和探针设计可有效区分 O1 群与其他霍乱弧菌或病原体。
快速检测:整个检测过程通常在 2-3 小时内完成,大大缩短了传统培养法所需的时间。
定量分析:通过标准曲线法,可以对样本中的 O1 群霍乱弧菌核酸进行定量分析。
操作简便:试剂盒提供了一站式的检测解决方案,操作步骤简单,易于标准化和自动化。
注意事项
严格分区操作:为避免交叉污染,应将实验分为试剂准备区、样本处理区和 PCR 扩增区。
防污染措施:所有操作需戴一次性手套,使用带滤芯吸头,实验结束后彻底清洁工作台。
试剂保存:试剂盒组分应按照说明书要求保存,通常需要避光、低温保存,避免反复冻融。
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