滤纸酶测定试剂盒/微量法/48S 新品

滤纸酶测定试剂盒/微量法/48S

测定意义：

纤维素酶是由微生物产生的多组分的酶系，能水解纤维素 β-1,4 葡萄糖苷键生成葡萄糖，研究滤纸酶活力对纤维素酶的研究具有非常重要的意义。

测定原理：

滤纸酶水解滤纸产生的还原糖能与 3,5-二硝基水杨酸生成红棕色氨基化合物，在 540nm 处有最大光吸收，在一定范围内反应液颜色深浅与还原糖的量成正比，可测定计算得滤纸酶的活力。

自备仪器和用品：

天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。

测定操作：
1、根据样本数量取两倍数量的滤纸条和 Ep 管，每支 Ep 管中放入一个卷状滤纸条（注意要放入底部），作为底物。
2、对照管：取 200μL 灭活的酶液，加入 500μL 试剂一，充分混匀，再加入放有滤纸条的 Ep 管中，标注为对照管。
3、测定管：取 200μL 酶液，加入 500μL 试剂一，充分混匀，再加入放有滤纸条的 Ep 管中，标注为测定管。
4、对照管和测定管同时置于 50℃水浴锅中反应30min。
5、加入 800μL 试剂二，沸水浴 5min ，自来水冷却后取 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板中测定 540nm 处吸光值，分别记为 A 对照管和 A 测定管，△A= A 测定管- A 对照管。

注 意：

1、用干净的镊子取出滤纸条，带手套卷成卷放入 Ep 管底部。

2、样本灭活时保证同一批样本处理时间一致，建议沸水浴十分钟。
3、批量样本测定之前先做 1-2 个样本的预实验，若吸光值超过 1.2，建议将样本用蒸馏水稀释后再进行测定，计算公式中乘以稀释倍数。
4、 显色后取检测液时注意枪头不要碰到滤纸条，以免带入毛状物，影响测定结果。