NCI-H841人小细胞肺癌细胞 新品

NCI-H841人小细胞肺癌细胞

商品属性：

种属来源：人

性别年龄：男性，51岁

组织来源：肺

生长特性：贴壁和悬浮

细胞形态：聚集漂浮生长和上皮样

细胞规格：1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

冻存条件：90% FBS + 10% DMSO

传代方法：1:3传代, 2-3天传1代

产品规格与包装

常规规格：

1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1 mL冻存管

培养条件

培养基：

DMEM/F-12基础培养基，补充以下成分：

0.005 mg/mL Insulin

0.01 mg/mL Transferrin

30 nM Sodium selenite

10 nM Hydrocortisone

10 nM β-estradiol

2 mM L-glutamine

5% FBS（胎牛血清）

1% Anti-Anti（抗生素）

操作指南

细胞接收与初始处理

取出培养瓶，用75%酒精消毒表面，移除封口膜后置于37℃、5% CO?培养箱静置3-4小时稳定细胞状态。

更换新鲜完全培养基继续培养或传代。

细胞传代

消化：当细胞覆盖80%培养面积时，弃旧培养基，PBS清洗后加入0.25% Y蛋白酶消化液1ml，显微镜下观察至细胞变圆。

终止消化：加入完全培养基终止反应，轻柔吹打使细胞脱落，转移至离心管（1000rpm离心5分钟）。

分瓶：弃上清，用12ml完全培养基重悬，按1:2比例分瓶培养。

细胞冻存

消化收集：同传代步骤1-2，离心后弃上清。

冻存液制备：用冻存液（FBS:DMSO=9:1）重悬细胞，分装至冻存管。

梯度降温：

-20℃保存1.5小时 → -80℃过夜 → 24小时后转入液氮长期保存。

若使用程序降温盒，可直接放置于-80℃。

细胞复苏

解冻：从液氮中取出冻存管（需防爆措施），37℃水浴快速解冻至无结晶。

离心清洗：将细胞转移至含5ml完全培养基的离心管（1000rpm离心5分钟），弃上清后重悬。

培养：接种至T25培养瓶，37℃、5% CO?培养箱中培养，贴壁后换液。
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