人结肠癌细胞带荧光素酶；HT-29/LUC (STR)
产品信息：
HT-29/LUC 是一种稳定表达荧光素酶的人结肠癌细胞系，由 HT-29 细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因构建而成，常用于活体动物成像实验和荧光素酶活性检测。
产品名称 | 人结肠癌细胞带荧光素酶；HT-29/LUC (STR) | 英文名称 | HT-29/LUC：HT29LUC |
货号 | AXB10005 | 生长特性 | 贴壁生长 |
来源与构建
该细胞系基于 HT-29 细胞（来源于人结肠腺癌），通过慢病毒转染方式导入 Luc 基因，使其稳定表达荧光素酶。
背景信息：HT-29 细胞最初由 J. Fogh 于 1964 年从一名 44 岁女性结肠癌患者的原发肿瘤分离获得，而 HT-29/LUC 则在此基础上增加了荧光素酶标记。
形态与生长特性
形态：上皮细胞样，贴壁生长。
生长特性：培养条件为 37℃、5% CO，推荐培养基为 90% DMEM 高糖培养基与 10% FBS 混合，并添加青霉素和链霉素（PS）。
药筛信息：Puro 药筛浓度为 1.0 μg/ml，培养过程中通常无需额外添加，但若担心抗性减弱，可定期用 0.5 μg/ml 浓度维持。
培养操作指南
复苏操作
将冻存管在 37℃ 水浴中快速解冻，加入 4-5 mL 预热的完全培养基混匀。
1000 rpm 离心 3-5 分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬，接种至 T25 培养瓶或 6 cm 皿，加入 4-8 mL 培养基，置于 37℃、5% CO 培养箱中培养过夜。
第二天换液并检查细胞密度，若细胞密度达 80%-90%，可进行传代。
传代方法
当细胞密度达到 80%-90% 时，进行传代。
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗 1-2 次。
加入 1 mL 消化液（0.25% Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，37℃ 消化 1-3 分钟，显微镜下观察细胞变圆并脱落时，加入含血清的培养基终止消化。
轻轻吹打制成单细胞悬液，1000 rpm 离心 3-5 分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬，按 1:2 至 1:3 比例分装至新培养瓶，补加 5-8 mL 培养基继续培养。
冻存操作
待细胞生长状态良好时，进行冻存。
收集细胞悬液，1000 rpm 离心 4 分钟，弃上清后用 PBS 清洗一遍，计数。
根据细胞数量加入无血清冻存液，调整细胞密度至 5×10?～1×10?/mL，每支冻存管冻存 1 mL 细胞悬液。
将冻存管放入 -80℃ 冰箱，24 小时后转入液氮灌储存。
注意事项与应用
操作要点
收到细胞后，首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞需检查干冰是否完全挥发，若有异常请及时联系供应商。
用 75% 酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态，因运输问题部分细胞可能形成碎片，属正常现象。
仔细阅读说明书，确保培养条件一致，若因培养条件不一致导致细胞问题，责任由客户自行承担。
建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，以便与供应商技术部沟通。
基本操作步骤：
原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。
传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。
冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。
培养操作要点：
基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置：
温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。
pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。
公司正在出售的产品：
phospho-RGS19(Tyr143) 英文名称： 0酸化G蛋白信号转导调节因子19抗体 0.1ml | ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit 人尿微量白蛋白Multi-class antibodies规格： 48T |
Rhesus antibody Rh MMP-8 基质金属蛋白酶-8抗体 规格 0.1ml | Rhesus antibody Rh HIV gp120 病毒抗体 规格 0.1ml |
HADHB 英文名称： 羟辅酶A脱氢酶β抗体 0.2ml | Anti-GRM2+GRM4/FITC 荧光素标记促代谢型谷氨酸受体2+4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
ADORA2B 英文名称： 腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体 0.2ml | AACT protein(Alpha chymotrypsin protein) 胰糜蛋白酶 5mg |
RASGEF1A 英文名称： 鸟嘌呤核苷酸交换因子rasgef1a抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh KLK5 激肽释放酶5抗体 规格 0.1ml |
Beta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原) 0.5mg | LONP1 英文名称： 线粒体离子肽酶1抗体 0.2ml |
2,4-D/KLH 2，4-二氯苯氧乙酸偶联血蓝蛋白 5mg | Anti-GCP-2/CXCL6 /FITC 荧光素标记抗粒细胞趋化蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
ECP 英文名称： 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗体 0.1ml | Anti-Vimentin 波形蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人神经特异性烯醇化酶Multi-class antibodies规格： 48T | 人结肠癌细胞带荧光素酶；HT-29/LUC (STR)phospho-Androgen Receptor (Ser515) 英文名称： 0酸化雄激素受体抗体 0.1ml |
Anti-PTP/PTPase/CD148 蛋白酪氨酸0酸酶CD148抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml | Anti-Bone sialoprotein 骨涎蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml |
具体特点如下：
环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。
生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
关键字： HT-29/LUC;人结肠癌细胞带荧光素酶;贴壁细胞;
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