产品信息:

人肝星形细胞带红色荧光(LX-2/RFP)是一种经过基因改造的肝星形细胞系,携带红色荧光蛋白(RFP)基因,常用于肝纤维化研究、细胞成像和药物筛选等领域。以下是其详细说明、培养操作和特性:
产品名称 | 人肝星形细胞带红色荧光;LX-2/RFP (STR) | 英文名称 | LX-2/RFP:LX2RFP |
货号 | AXB10012 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
细胞特性
来源:LX-2/RFP细胞系源自一名59岁男性肝纤维化患者的肝组织,是LX-2细胞系的RFP标记版本。LX-2细胞系通过SV40大T抗原永生化技术建立,保留了肝星状细胞的核心特性。
形态:星状或上皮样,贴壁生长,具有长的胞质突起。
荧光特性:稳定表达红色荧光蛋白(RFP),在蓝光或紫外光激发下发出红色荧光,便于活细胞成像和追踪
生长特性:生长速度较慢,倍增时间约为48-96小时(约3-4天),可在低血清(1%FBS)条件下生长,并保持高效转染性。
STR鉴定:通过STR鉴定确认细胞身份,避免交叉污染。
2. 培养操作
2.1. 培养基配置
基础培养基:通常使用DMEM高糖培养基。
补充成分:添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/链霉素混合液(双抗)。
2.2. 培养条件
温度与气体环境:37℃,5% CO,饱和湿度。
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基,或根据细胞密度和培养基颜色变化及时更换。
2.3. 细胞传代
传代比例:当细胞密度达到80%-90%时进行传代,推荐1:2至1:4的比例。
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA溶液消化细胞,显微镜下观察细胞变圆并开始脱落时,加入含血清培养基终止消化。
离心与重悬:将消化后的细胞悬液收集到离心管中,1000 rpm离心5分钟,弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞沉淀。
分瓶培养:将细胞悬液按适当比例分配到新的培养瓶中,补加适量新鲜培养基,轻轻混匀后放入培养箱继续培养。
2.4. 细胞冻存与复苏
冻存液配方:90%胎牛血清+10%DMSO,现用现配。
冻存步骤:收集对数生长期细胞,计数后调整细胞密度至(1-5)×10^6个/mL,加入冻存液混匀,分装至冻存管中,标记好信息。将冻存管置于程序降温盒中,先放-80℃冰箱过夜,然后转入液氮罐中长期保存。
复苏步骤:从液氮罐中取出冻存管,迅速放入37℃水浴中摇晃解冻。用75%酒精擦拭冻存管外壁后,将细胞悬液转移至含有预热培养基的离心管中,1000 rpm离心5分钟,弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞沉淀。将细胞悬液接种到培养瓶中,放入培养箱中培养,次日更换新鲜培养基。
3. 注意事项
无菌操作:整个操作过程需在超净工作台中进行,严格遵守无菌操作规范,避免细胞污染。
细胞状态观察:定期在显微镜下观察细胞形态和生长状态,记录细胞密度和健康状况,及时处理异常情况。
培养基选择:确保使用新鲜配制的培养基,避免使用运输用的灌液培养基继续培养细胞。
冻存与复苏技巧:冻存时采用程序降温法可提高细胞存活率;复苏时快速解冻并立即加入培养基可减少细胞损伤。
培养操作要点:

基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运;以ATP为核心载体,通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能;通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导;原核细胞采用二分裂,真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖;细胞可进行程序性死亡(凋亡),并在多细胞生物中实现分化形成不同组织
注意事项与应用
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
公司正在出售的产品:
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Rhesus antibody Rh EGFL8 表皮生长因子样蛋白8抗体 规格 0.2ml | Rhesus antibody Rh MMS21/NSE2 E3连接酶MMS21蛋白抗体 规格 0.2ml |
Hepsin 英文名称: 跨膜蛋白酶丝酸1抗体 0.2ml | Anti-FAM3A/FITC 荧光素标记胰腺衍生因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
DTNBP1 英文名称: 易感基因抗体 0.1ml | AACT/RBITC 罗丹明标记胰糜蛋白酶 0.3ml |
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Anti-phospho-c-Raf (Ser338) 0酸化原癌基因c-Raf抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | Anti-Phospho-cdc25A (Thr506) 0酸化细胞分裂周期蛋白25抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
关键字: LX-2/RFP;人肝星形细胞带红色荧光;贴壁细胞;
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