人肝癌细胞带荧光素酶;HuH-7/LUC (STR)
产品信息:

HuH-7/LUC细胞是一种携带荧光素酶(Luciferase)基因的人肝癌细胞系,源自原始的HuH-7细胞系。
该细胞系通过稳定整合荧光素酶基因,能够在加入底物荧光素(Luciferin)后发出生物荧光,便于活体成像和实时监测肿瘤生长或转移。以下是其详细说明、培养操作和特性:
产品名称 | 人肝癌细胞带荧光素酶;HuH-7/LUC (STR) | 英文名称 | HuH-7/LUC:HuH7LUC |
货号 | AXB10029 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞特性
来源:HuH-7/LUC细胞是从人肝癌组织中分离得到的HuH-7细胞系衍生而来,属于肝细胞癌模型。
荧光素酶标记:该细胞系稳定表达了荧光素酶基因,可在加入荧光素底物后发出生物荧光,适用于活体成像和实时监测肿瘤生长或转移。
形态:上皮细胞样,贴壁生长。
应用:广泛用于肝癌研究,包括肿瘤生长机制、药物筛选、治疗反应评估及转移研究等。
2. 培养操作
2.1. 培养基
使用DMEM高糖培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素溶液(双抗)。
2.2. 培养条件
温度:37°C。
气体环境:95%空气 + 5% CO
湿度:饱和湿度。
2.3. 传代步骤
观察细胞密度:当细胞融合度达到80%-90%时进行传代。
去除旧培养基:轻轻吸去培养瓶中的旧培养基。
清洗细胞:用预热的PBS轻轻清洗细胞一次。
消化细胞:加入适量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,置于37°C培养箱中消化2-3分钟,显微镜下观察细胞消化情况。
终止消化:加入适量含血清的新培养基终止消化,轻轻吹打使细胞脱落并均匀悬浮。
分装细胞:将细胞悬液按1:2至1:4的比例分装到新的培养瓶中,加入新鲜培养基。
继续培养:将培养瓶放回培养箱中继续培养。
2.4. 冻存与复苏
冻存:使用含有90%胎牛血清和10%DMSO的冻存液,将细胞悬液分装到冻存管中,按照标准冻存程序逐步降温后存放在液氮罐中。
复苏:从液氮中取出冻存管,迅速放入37°C水浴中摇晃解冻,然后将细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中,离心后弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,接种到培养瓶中继续培养。
3. 注意事项
荧光素酶活性检测:在进行生物发光成像前,需向细胞或动物模型中加入荧光素底物,使用活体成像系统(IVIS)检测发光信号。
细胞状态监控:定期观察细胞形态和生长状态,确保无污染,并根据实验需求调整传代比例和培养条件。
基本操作步骤:

原代培养:取材→分离→培养,需保持材料新鲜及严格无菌2。
传代培养:贴壁细胞需胰酶消化,悬浮细胞可直接传代,离心后重悬分瓶23。
冻存与复苏:使用含10%DMSO的冻存液,程序降温后液氮保存;复苏时快速37℃水浴解冻。
培养操作要点:

基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
公司正在出售的产品:
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phospho-KLF5(Ser275) 英文名称: 0酸化KLF5抗体 0.1ml | Anti-ER-Alpha 雌激素受体α抗体(用于western blot)Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
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具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
关键字: HuH-7/LUC;人肝癌细胞带荧光素酶;贴壁细胞;
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