人骨髓基质细胞；HS-5 (STR)

                                                           人骨髓基质细胞；HS-5 (STR)
产品信息：

HS-5细胞是一种人源骨髓基质细胞系，具有成纤维细胞形态和贴壁生长特性，广泛用于科研领域。以下是基于权威来源的综合说明：

细胞特性与背景

来源：源自30岁白人男性的骨髓基质，由ATCC保藏。

基因表达：可表达粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、白细胞介素等因子。

用途：仅限科研，不可用于人类或动物疾病治疗。

培养操作

培养基与条件

基础培养基：DMEM或α-MEM，添加10%-20%胎牛血清（FBS）和1%双抗（如青霉素/链霉素）。

培养环境：37°C、5% CO、湿度70%-80%。

复苏与传代

复苏步骤：37°C水浴快速解冻冻存管（1-2分钟），转移至含新鲜培养基的离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃上清后重悬细胞并接种T25瓶（6-8 mL培养基），培养过夜。

传代方法：

细胞密度达80%-90%时进行传代。

弃培养上清，PBS润洗1-2次；加入0.25%胰酶-EDTA（1-2 mL），37°C消化1-3分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落时终止消化。

离心（1000 RPM，5分钟），重悬后按1:2-1:4比例分装新瓶（首次建议1:2）。

冻存

使用90%完全培养基+10%DMSO或90%FBS+10%DMSO，液氮储存；建议在培养前3代冻存细胞种子。

关键注意事项

污染防控：严格无菌操作，定期检测支原体；传代时避免过度消化。

细胞状态监测：定期观察形态和培养基pH值，及时换液传代。

运输与接收：复苏发货为T25瓶，冻存发货为1 mL冻存管；收到后先75%酒精消毒，静置2-4小时稳定状态。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。