人神经母细胞瘤细胞；sh-sy5y转染野生型

                                                           人神经母细胞瘤细胞；sh-sy5y转染野生型
产品信息：

人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y转染野生型细胞是一种常用于神经科学研究的细胞模型，尤其在研究神经退行性疾病、神经毒性及神经分化等方面具有重要价值。以下是关于SH-SY5Y转染野生型细胞的详细说明、培养操作和特性：

细胞来源与特性   SK-N-SH细胞系的三次克隆亚系，携带野生型基因，表达中等水平的多巴胺β羟化酶，可分化为神经元样细胞，模拟神经元功能

培养基   MEM或DMEM基础培养基+10%胎牛血清（FBS）+1%双抗（P/S）

培养条件   37℃、5% CO、饱和湿度环境

传代方法   细胞密度达70%-80%时传代，用胰酶消化，按1:2至1:5比例分瓶

冻存与复苏   冻存用含10% DMSO的无血清冻存液，液氮保存；复苏时37℃水浴快速解冻，离心后重悬接种

应用   研究神经退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病）、神经毒性、神经分化及基因功能等

培养操作步骤

复苏细胞：

从液氮中取出冻存管，迅速投入37℃水浴中快速解冻。

将细胞悬液转移至含5-6mL完全培养基的离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，接种到预热的培养瓶中，37℃、5% CO培养箱中培养过夜。

细胞传代：

当细胞密度达到70%-80%时进行传代。

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入0.25%胰酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。

加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打使细胞悬浮。

1000rpm离心5分钟，弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，按1:2至1:5的比例分装到新的培养瓶中，补加新鲜培养基，继续培养。

细胞冻存：

选择生长状态良好的细胞，收集细胞悬液，1000rpm离心5分钟，弃去上清液。

用无血清冻存液重悬细胞，分装至冻存管中，逐步降温后存于液氮罐或-80℃冰箱。

注意事项

无菌操作：整个培养过程需在无菌条件下进行，避免污染。

细胞观察：定期在显微镜下观察细胞形态和密度，及时换液和传代。

培养基更换：每隔2-3天更换一次培养基，以维持细胞的健康状态。

安全防护：操作时需佩戴防护装备，如手套、口罩和护目镜，避免接触有害物质。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。