人弥漫性组织细胞性淋巴瘤；NU-DUL-1

                                                           人弥漫性组织细胞性淋巴瘤；NU-DUL-1
产品信息：

人弥漫性组织细胞性淋巴瘤NU-DUL-1是一种源自人弥漫性大B细胞淋巴瘤的细胞系，具有悬浮生长的淋巴母细胞样形态，常用于淋巴瘤研究。以下是其详细说明、培养操作和特性：

细胞特性

来源与背景：NU-DUL-1细胞系源自一名43岁男性患者的腹腔积液，原发肿瘤为弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）。该细胞系常用于淋巴瘤的研究，包括肿瘤发生机制、药物筛选和信号通路研究。

形态特性：细胞呈淋巴母细胞样形态，悬浮生长。

生长特性：生长较快，适合用于体外实验研究。

分子特征：表达B细胞标志物，如CD19、CD20和PAX-5，具有DLBCL的典型特征

2. 培养操作

2.1. 培养基与条件

培养基：推荐使用RPMI-1640培养基，添加15%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素/链霉素）。

培养环境：37°C、5% CO、饱和湿度环境。

换液周期：每2-3天换液一次，或根据细胞密度和培养基颜色变化及时更换。

2.2. 复苏与传代

复苏步骤：从液氮中取出冻存管，快速置于37°C水浴中解冻，将细胞悬液转移至含新鲜培养基的离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃上清后重悬细胞并接种培养瓶，置于培养箱中培养过夜。

传代方法：当细胞密度达80%-90%时进行传代。由于NU-DUL-1为悬浮细胞，无需胰酶消化，可直接离心收集细胞，用新鲜培养基重悬后按1:2至1:4比例分瓶传代。

2.3. 冻存

冻存液：90%胎牛血清（FBS）+10%DMSO。

冻存步骤：收集悬浮细胞，离心后弃上清，用冻存液重悬细胞，调整细胞密度至1×10?细胞/mL，分装至冻存管中，逐步降温后存于液氮或-80°C冰箱。

3. 研究应用

肿瘤机制研究：NU-DUL-1细胞常用于研究弥漫性大B细胞淋巴瘤的发生、发展机制，包括信号通路、基因表达调控等。

药物筛选：用于筛选和评估针对弥漫性大B细胞淋巴瘤的新型药物，研究药物对细胞增殖、凋亡的影响。

基因功能研究：通过基因敲除、过表达等技术，研究特定基因在淋巴瘤中的功能和作用机制。

4. 注意事项

污染防控：严格无菌操作，定期检测支原体、细菌、真菌污染。

细胞状态观察：定期在显微镜下观察细胞形态和生长状态，确保细胞健康。

生物安全：虽然生物安全等级为1级，但仍需遵循标准微生物操作规范。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。