蛋白A磁珠
蛋白A磁珠(Protein A Magnetic Beads)是基于免疫亲和原理开发的用于抗体纯化和免疫沉淀实验的关键材料,其核心在于磁珠表面偶联的蛋白A与免疫球蛋白(尤其是IgG)之间的高度特异性结合能力。蛋白A是一种从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)中分离纯化得到的蛋白质,分子量约为42kDa,其分子结构中含有五个高度同源的IgG结合结构域,每个结构域都能与IgG的Fc段(可结晶片段)特异性结合,而不影响IgG的Fab段(抗原结合片段)与抗原的结合活性。
蛋白A磁珠的制备过程需经过严格的工艺控制,以确保蛋白A的活性和结合效率。首先制备超顺磁性纳米颗粒内核,然后包覆惰性聚合物层(如琼脂糖、葡聚糖或聚苯乙烯),聚合物层不仅能提高磁珠的稳定性和分散性,还能提供丰富的活性基团(如氨基、羧基)用于蛋白A的偶联。通过化学交联剂(如戊二醛、N-羟基琥珀酰亚胺等)将蛋白A共价偶联到磁珠表面,形成稳定的蛋白A磁珠复合物。磁珠的粒径通常在2-10μm之间,这一尺寸范围既能保证足够的结合容量,又能在磁场作用下快速分离,提高实验效率。
在应用方面,蛋白A磁珠具有广泛的用途。在抗体纯化领域,无论是从动物血清、杂交瘤细胞培养上清还是重组蛋白表达体系中纯化IgG,蛋白A磁珠都表现出高效性和特异性。纯化过程简单快速,将样本与磁珠在适宜的缓冲液(如pH7.0-7.5的PBS)中孵育一段时间,蛋白A与IgG结合后,通过磁分离架去除上清液,再用酸性洗脱液(如pH2.5-3.0的甘氨酸-HCl缓冲液)洗脱,中和后即可得到高纯度的IgG抗体,纯度可达95%以上。在免疫沉淀(IP)实验中,蛋白A磁珠可与特异性抗体结合,形成磁珠-抗体复合物,然后与样本中的抗原结合,通过磁分离富集抗原-抗体-磁珠复合物,从而实现对目标抗原的分离和检测,广泛应用于蛋白质相互作用研究、蛋白质表达水平分析等。此外,蛋白A磁珠还可用于流式细胞术、免疫印迹(Western Blot)等实验中的样本预处理,具有操作简便、耗时短、回收率高、非特异性吸附低等优点,是生命科学研究中不可或缺的工具之一。
用途:科研
包装:瓶装
产地:西安瑞禧生物科技有限公司
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