蛋白质羰基测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
蛋白质羰基是多种氨基酸在蛋白质的氧化修饰过程中的早期标志,其含量高低表明蛋白质氧化损伤程度的大小,是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。
测定原理:
羰基与 2,4-二硝基苯肼反应生成红色 2,4-二硝基苯腙,在 370nm 处有特征吸收峰。
自备仪器和用品:
天平、恒温水浴锅、低温离心机、漩涡震荡仪、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水,无水乙醇,乙酸乙酯。测定步骤和操作表:
对照管
测定管
样品(mL)
0.2
试剂二(mL)
0.4
试剂三(mL)
混匀,37℃避光反应 1h
试剂四(mL)
0.5
静置 5min ,4℃, 12000g 离心 15min,弃上清,留沉淀
试剂五(mL)
1.0
漩涡混匀,4℃, 12000g 离心 10min,弃上清,留沉淀
试剂六(mL)
漩涡混匀,37℃温育 15min ,沉淀全部溶解后,4℃ , 12000g 离心 15min ,取上清,1mL 玻璃比色皿,试剂六调零,分别记录 370nm 对照管和测定管在的吸光值,ΔA370 =A370 测定管-A370 对照管
1、试剂一使用之前根据要测定的样品数现配,配置好后 4℃保存,若变为黑色,则不能使用。
2、试剂二见光易分解,反应需严格避光。
上海酶联生物科技有限公司
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