人热休克蛋白70(HSP70)elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性
双抗体夹心ELISA技术
捕获抗体：微孔板预包被抗HSP70单抗（如小鼠IgG2a），靶向HSP70的ATP结合域（检测范围0.2–50 ng/mL）。
信号放大：生物素-链霉亲和素-HRP三级放大系统，搭配超敏化学发光底物（灵敏度达0.1 ng/mL）。
抗干扰设计：含ATP类似物（如ADP，1 mM）阻断非特异性结合，降低与HSP90/HSP60交叉反应（＜0.3%）。
动态范围优化
覆盖基础表达（健康人血清0.5–5 ng/mL）至应激水平（热休克后细胞裂解液＞20 ng/mL）。
产品名称 | 人热休克蛋白70(HSP70)elisa试剂盒 | 英文名称 | HSP70 Elisa Kit |
规格 | 48T\96T | 货号 | XG-EH0416 |
种属 | 人 | 用途 | 仅供科研实验 |
二、核心组分与样本要求
组分 技术参数
预包被96孔板 抗HSP70（氨基酸残基400-450）抗体固定化（批间差＜7%）
标准品 重组人HSP70（0、0.5、2、10、25、50 ng/mL，含5%甘油冻存保护剂）
适用样本 血清（首选）、血浆（EDTA抗凝）、细胞裂解液（需含1% NP-40）、组织匀浆
特殊添加剂 含1 mM DTT（维持还原环境），2–8℃保存有效期24个月
三、临床应用与科研价值
应激与疾病标志物
热休克反应：细胞应激后HSP70表达升高（如高温、氧化应激后2小时达峰值）。
神经退行性疾病：阿尔茨海默病患者脑脊液HSP70水平与tau蛋白聚集相关。
肿瘤预后评估
乳腺癌、肺癌患者血清HSP70＞15 ng/mL提示化疗耐药风险（敏感性78%）。
心血管保护机制
心肌缺血再灌注损伤中，HSP70通过抑制凋亡通路发挥保护作用。
四、操作规范与质控要点
样本处理
细胞样本需在裂解液中加入蛋白酶抑制剂（如1 mM PMSF），冰上操作。
避免反复冻融（HSP70易形成聚集体）。
实验关键
温育条件：37℃避光1小时，洗涤液需含0.05% Tween-20（pH 7.4）。
质控标准
每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（回收率90–110%）。
五、性能比较与注意事项
特性 优势 局限性
灵敏度 可检测胞内与分泌型HSP70 无法区分HSP70不同亚型（如HSPA1A/HSPA1B）
特异性 与HSP90/HSP60交叉反应＜0.5% 高浓度样本需验证稀释线性（＞50 ng/mL）
通量 适配自动化平台 组织样本需优化均质化方法
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