L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
L-半乳糖途径是合成 AsA 的主要途径。Gal LDH 位于线粒体内膜,负责催化植物体内 AsA 生物合成的最后一步,也是该途径的关键酶之一,对植物体内 AsA 含量的积累起着至关重要的作用。
测定原理:
Gal LDH 催化 L-半乳糖内酯还原细胞色素 c(Cyt c),还原型 Cyt c 在 550nm 有吸收峰;测定还原型 Cyt c增加速率,来计算 Gal LDH 活性。
自备仪器用品:
台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。Gal LDH 测定操作:1. 分光光度计预热 30 min ,调节波长到 550nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在 25℃水浴锅中预热 30 min。
3. 依次在 1mL 玻璃比色皿中加入 100μL 上清液、800μL 预热的试剂二和 100μL 试剂三,迅速混匀后于550nm 比色,记录 10s 和 130s 的吸光值 A1 和 A2 ,△A = A2 -A1。
注 意:试剂二和试剂三配制好后 3 天内使用完。
上海酶联生物科技有限公司
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