土壤羟胺还原酶(HR)测定试剂盒/微量法/48S
测定意义:
土壤羟胺还原酶能将土壤中氮代谢过程中形成的中间产物羟胺还原为氨,土壤中的还原态化合物可作为氢的供体,其强弱影响到土壤氮代谢过程中氮素的氨挥发损失,间接影响氮肥的利用效率。
测定原理:
硫酸铁铵中的 Fe3+可将羟胺氧化为氮气,自身被还原为 Fe2+ ,Fe2+在弱酸条件下与邻菲罗琳形成橙红色配合物,在 510nm 处有吸收峰,羟胺还原酶作用于羟胺,使配合物形成量减少,510nm 处吸光值的减少可反映羟胺还原酶的活性。
自备仪器和用品:
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、震荡仪、氮吹仪。测定操作表:
空白管
对照管
测定管
风干土样(g)
0.02
试剂一 (μL)
40
蒸馏水(μL)
试剂二(μL)
试剂三(μL)
120
混匀后,用 N2 气流排除管中空气,立即密封,于 30℃反应 1h
试剂四(μL)
80
充分震荡 10min ,8000rpm ,25℃, 离心 10min
上清液(μL)
20
试剂五(μL)
试剂六(μL)
试剂七(μL)
100
充分混匀,25℃静置显色 10min,用蒸馏水调零,于微量石英比色皿/96 孔板测定
510nm 各管吸光值,分别记为 A 空白管、A 标准管、A 对照管、A 测定管,△A =A 空白管-(A 测定管-A 对照管)。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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