羧酸酯酶(CarE)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
哺乳动物 CarE ,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝氨酸水解酶家族。CarE 催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE 参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制 CarE活性。
测定原理:
CarE 能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固蓝显色;在 450 nm光吸收增加速率, 计算 CarE 活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。测定步骤:1. 分光光度计预热 30min ,调节波长到 450 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二置于 37℃水浴中预热 30 min。
3. 空白管:取 1mL 玻璃比色皿,依次加入 5μL 蒸馏水和 1000μL 试剂二,迅速混匀,于 450nm 处测定3min内吸光值变化,第 10s 吸光值记为 A1 ,第 190s 吸光值记为 A2 。△A 空白管=A2-A1。
4. 测定管:取 1mL 玻璃比色皿,依次加入 5μL 上清液和 1000μL 试剂二,迅速混匀,于 450nm 处测定3min内吸光值变化,第 10s 吸光值记为 A3 ,第 190s 吸光值记为 A4 。△A 测定管=A4-A3。
注 意:
空白管只需测定一次。
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