乙酰胆碱酯酶(AchE)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
AchE 属于丝氨酸水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE 催化乙酰胆碱(Ach)水解,在神经传导调节中起重要作用。
测定原理:
AchE 催化 Ach 水解生成胆碱,胆碱与二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成 5-巯基-硝基苯甲酸(TNB); TNB 在 412nm 处有吸收峰,通过测定 412 nm 吸光度增加速率,计算 AchE 活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿和蒸馏。测定操作:
1. 分光光度计预热 30 min ,调节波长到 412 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二置于 37℃水浴中预热 30min。
3. 取 1mL 玻璃比色皿,依次加入 100μL 上清液、800 μL 试剂一、50μL 试剂二和 50 μL 试剂三,迅速混匀,于 412nm 处测定 3min 内吸光值变化, 第 10s 吸光值记为 A1 ,第 190s 吸光值记为 A2 。 △A 测定管 =A2-A1。注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
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