土壤酸性磷酸酶(S-ACP)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH显著影响,根据最适 pH 范围,通常分为酸性、中性和碱性三种类型。
测定原理:
酸性环境中,S-ACP 催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出 S-ACP活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。
测定步骤:
1. 分光光度计预热 30 min ,调节波长到 660 nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 μL 蒸馏水,100 μL 试剂三,20 μL 试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水 830 μL ,混匀后 25℃静置 30 min ,于 660 nm 测定吸光度,记为 A 空白管。
3. 标准管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 μL 标准液,100 μL 试剂三,20 μL 试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水 830 μL ,混匀后 25℃静置 30 min ,于 660 nm 测定吸光度,记为 A 标准管。
4. 测定管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 μL 上清液,100 μL 试剂三,20 μL 试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水 830 μL ,混匀后 25℃静置 30 min ,于 660 nm 测定吸光度,记为 A 测定管。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
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