鸽副粘病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Pigeon Paramyxovirus (PPMV) Dye-based qRT-PCR Kit
规格
50T
货号
PR3393
产品概述
本试剂盒采用染料法荧光定量RT-PCR技术,针对鸽副粘病毒(Pigeon Paramyxovirus, PPMV)保守序列设计特异性引物,实现高灵敏度、高特异性的RNA检测。适用于科研领域对可疑感染样本的病原学分析,不可用于临床诊断。
检验原理
通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增病毒RNA,结合荧光染料实时监测扩增信号,定量检测病毒拷贝数。部分试剂盒采用TaqMan探针法,进一步降低非特异性扩增风险。
试剂组成
核心组分(以50T规格为例):
2×qPCR预混液(含荧光染料)
特异性引物混合物
阳性对照(1×10^8 拷贝/μL)
阴性对照
模板稀释液
其他版本可能包含:
酶液(逆转录酶、DNA聚合酶)
独立包装的反应液
储存与运输
储存条件:-20℃±5℃避光保存,避免反复冻融(≤5次)。
有效期:12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪,包括:
ABI 7500
安捷伦 MX3000P/3005P
Bio-Rad CFX系列
LightCycler
样本要求
组织样本:脑、肺、脾、肾等(需匀浆处理)。
拭子样本:口咽或泄殖腔拭子,保存于含抗生素的PBS缓冲液(pH 7.0-7.4)。
性能参数
灵敏度:最低检测限为数百拷贝/反应。
特异性:与常见禽类病毒(如新城疫病毒)无交叉反应。
操作流程
RNA提取:按标准方法提取样本RNA。
反应体系配制:20μL体系含预混液、引物、模板RNA。
PCR扩增:按仪器程序设置逆转录(50℃ 15min)、预变性(95℃ 5min)、循环扩增(95℃ 10s→60℃ 30s,40循环)。
结果分析:根据Ct值及标准曲线计算病毒载量。
注意事项
实验需在无菌环境下操作,避免污染。
不同批号试剂不可混用。
阳性对照需单独存放,防止交叉污染。
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