泰勒氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 泰勒氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Taylorella spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3397 |
产品概述
本试剂盒为通用型染料法荧光定量PCR检测系统，适用于泰勒氏菌属（如马生殖泰勒氏菌、环形泰勒虫等）的核酸定性及定量分析。采用优化引物和探针设计，具有高灵敏度和特异性，可有效避免与其他病原体DNA/RNA的交叉反应。
产品组分
荧光PCR反应液：预混染料法Master Mix（含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等）
引物与探针：针对泰勒氏菌属高度保守区域设计
阳性对照：无传染性DNA片段（1×10^8拷贝/μL）
模板稀释液：用于标准曲线制备
DEPC-H₂O：无核酸酶水（部分版本提供）
操作步骤
样本DNA提取
使用兼容的核酸提取试剂盒提取待测样本DNA，建议在样本制备区操作。
标准曲线制备（样本制备区）
标记6支离心管为7至2号，分别加入45 μL模板稀释液（或DEPC-H₂O）。
取5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到1×10^7拷贝/μL的标准品。
依次梯度稀释至2号管（1×10^2拷贝/μL），每次稀释需更换枪头。
PCR反应体系配制（反应配制区）
按20μL体系配制：
荧光PCR反应液 10 μL
引物探针混合液 2 μL
模板DNA 2 μL
DEPC-H₂O 补至20 μL
荧光定量PCR程序
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：
95℃ 15秒
60℃ 30秒（采集荧光信号）
注意事项
分区操作：标准品稀释与样本处理需在独立区域进行，避免气溶胶污染。
质量控制：每批次实验需包含阴性对照（DEPC-H₂O）及标准曲线（R²≥0.99）。
适用范围：仅限科研用途，不可用于临床诊断。
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
性能参数
灵敏度：最低检测限≤10拷贝/μL
线性范围：1×10^2~1×10^7拷贝/μL（R²≥0.99）
特异性：不与常见马属动物病原体交叉反应
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