组织胞浆菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 组织胞浆菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Histoplasma spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3402 |
产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发，专用于组织胞浆菌（Histoplasma spp.）的快速、高灵敏度检测。适用于科研用途，可进行定性和定量分析，线性范围覆盖至少5个数量级。
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，预混优化引物及反应体系。
高灵敏度与特异性：引物针对组织胞浆菌高度保守区设计，避免交叉反应。
内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，便于排除假阴性。
全平台兼容：无需调节ROX，适配主流qPCR仪，96孔板复孔偏差Ct值<0.2。
快速检测：反应时间快至46分钟，标准曲线重复性优异。
组分清单
预混荧光定量PCR Master Mix（含染料）
组织胞浆菌特异性引物（10 μM）
阳性对照DNA（1×10^8拷贝/μL）
荧光PCR专用模板稀释液
RNase-free H₂O
说明书
操作步骤
1. 试剂准备
解冻与混匀：将预混液从-20℃取出，置于冰上缓慢解冻（5-10分钟），轻颠倒混匀后短暂离心（1000 rpm，5-10秒）。
避免气泡：混匀时避免剧烈震荡，防止酶活性损失。
2. 标准曲线制备（以10^2–10^7拷贝/μL为例）
标记6管，分别加入45 μL稀释液。
取5 μL阳性对照（10^8拷贝/μL）加入第1管，震荡混匀得10^7拷贝/μL标准品，依次10倍稀释至10^2拷贝/μL。
所有稀释步骤需在独立区域操作，避免污染。
3. PCR反应体系（20 μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| 预混Master Mix | 10 |
| 引物（上下游混合） | 0.8 |
| 模板DNA | 2 |
| RNase-free H₂O | 7.2 |
4. 上机程序
预变性：95℃ 3分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
熔解曲线分析（可选）：60–95℃，每0.5℃递增。
注意事项
防污染：实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），使用带滤芯枪头。
稳定性：解冻后试剂需置于冰上，避免反复冻融。
应用限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断。
技术参数
规格：50T/盒（20 μL/反应）
储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
质量控制：批间差Ct值<0.5，熔解曲线单峰。
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