小鼠促红细胞生成素(EPO)elisa试剂盒

1. 概述

促红细胞生成素（EPO）**是由肾脏和肝脏分泌的糖蛋白激素（分子量30-34kDa），通过结合EPO受体（EPOR）刺激红细胞生成。作为贫血治疗的关键靶点和缺氧反应的标志分子，其检测对血液疾病、肿瘤微环境和高原适应研究具有重要意义。

2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（高特异性）：

捕获抗体：预包被抗小鼠EPO单抗（克隆R2E9）特异性结合EPO

检测抗体：生物素化抗小鼠EPO单抗（克隆R3B8）识别不同表位

信号放大：链霉亲和素-HRP催化超敏TMB显色

检测：OD450nm值与EPO浓度正相关（检测范围：15-2000 pg/mL）

 3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  高亲和力板

EPO标准品  15-2000 pg/mL  -20℃  NIBSC 87/684标定

生物素化抗体  100 μL  -20℃（避光）  无载体蛋白

SA-HRP  100 μL  2-8℃  RZ>3.0

稳定型TMB  10 mL  2-8℃（避光）  低背景

红细胞裂解液  10 mL  室温  防血红蛋白干扰

4. 样本要求

适用样本：

血清（推荐眼眶采血）

血浆（肝素抗凝）

肾组织匀浆（含蛋白酶抑制剂）

骨髓上清液

特殊处理：

避免使用溶血样本（Hb>0.2 g/dL）

缺氧模型需标注暴露时长

稳定性：

4℃保存≤48h

-80℃可保存6个月

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5mL PBS复溶

7点梯度稀释（15、50、100、250、500、1000、2000 pg/mL）

关键步骤：

加样体积：50μL样本+50μL稀释液

一抗孵育：4℃过夜（提高灵敏度）

显色控制：室温精确12min

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