小鼠白介素3(IL-3)elisa试剂盒
1. 概述
**白细胞介素3（IL-3）**是由活化T细胞分泌的造血生长因子（分子量15-17kDa），通过结合IL-3Rα/CD123受体促进髓系祖细胞增殖分化。作为多能集落刺激因子（Multi-CSF），其检测对造血异常、过敏性疾病和肿瘤免疫微环境研究具有重要意义。
2. 检测原理
双抗体夹心ELISA（高灵敏度化学发光法）：
捕获抗体：预包被抗小鼠IL-3单抗（克隆MP2-8F8）特异性结合IL-3
检测抗体：生物素化抗小鼠IL-3单抗（克隆MP2-43D11）识别不同表位
信号放大：链霉亲和素-碱性磷酸酶（SA-ALP）催化CSPD发光
检测：发光强度（RLU）与IL-3浓度正相关（检测范围：2-500 pg/mL）
3. 试剂盒组成
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T（可拆） 2-8℃ 低吸附表面处理
IL-3标准品 2-500 pg/mL -20℃ WHO标准（NIBSC 89/548）溯源
生物素化抗体 100 μL -20℃（避光） 无载体蛋白
SA-ALP 100 μL 2-8℃ RZ>3.5
化学发光底物 10 mL 2-8℃（避光） 动态范围10?
细胞刺激剂 5 mL -20℃ 含PMA/离子霉素
4. 样本要求
适用样本：
血清（推荐无溶血）
脾细胞培养上清（ConA刺激）
骨髓液（肝素抗凝）
过敏模型支气管灌洗液（BALF）
特殊处理：
避免使用EDTA抗凝（影响细胞因子释放）
高脂血样本需超滤（TG>300 mg/dL）
稳定性：
4℃保存≤24h（需加蛋白酶抑制剂）
-80℃分装冻存≤3个月
5. 实验流程优化
标准曲线建立：
冻干标准品用0.5mL含1% BSA的PBS复溶
7点梯度稀释（2、5、20、50、100、250、500 pg/mL）
关键步骤：
加样体积：50μL样本+50μL稀释液
一抗孵育：4℃过夜（提高灵敏度）
化学发光读数：积分时间100ms/孔
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