预期用途
本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆或其他生物液体中YY肽（PYY）的含量，适用于科研实验，不用于临床诊断。
产品名称 | 人YY肽(PYY)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human PYY ELISA Kit |
分类 | Human/人Elisa试剂盒 | 检测范围 | 12.35pg/mL-1,000pg/mL |
灵敏度 | 6.175pg/mL | 货号 | PH33024 |
实验原理
采用双抗体夹心法。将纯化的PYY抗体包被于微孔板形成固相载体，依次加入待测样本或标准品、生物素标记的PYY抗体及HRP标记的亲和素。经洗涤后，加入TMB底物显色，在过氧化物酶催化下产生蓝色产物，酸性终止液作用下转为黄色。颜色深度与样本中PYY浓度呈正相关，于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。
试剂盒组成
预包被微孔板：96孔（可拆卸）
标准品（冻干粉）：2瓶，临用前以稀释液复溶至1 mL，初始浓度6,000 pg/mL，可梯度稀释为3,000、1,500、750、375、188、94 pg/mL，稀释液作为0 pg/mL空白对照。
生物素化抗体：0.4 mL（30倍浓缩）
酶结合物：HRP标记亲和素，12 mL
显色液：TMB底物，15 mL
终止液：1N硫酸，12 mL
洗涤缓冲液（40×浓缩）：50 mL，使用前需稀释。
封板膜：2张
操作步骤
标准品制备：按说明书梯度稀释，避免孔内直接稀释。
加样：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃液后以洗涤液注满孔板，静置30秒，重复5次。
加生物素化抗体：每孔100 μL，37℃孵育60分钟。
加酶结合物：每孔100 μL，37℃避光反应30分钟。
显色：加入TMB底物100 μL，避光显色15分钟。
终止与检测：加入终止液50 μL，5分钟内测定450 nm OD值。
注意事项
试剂盒保存于2–8℃，复溶后标准品需一次性使用。
避免反复冻融样本，溶血或高脂样本可能干扰结果。
操作时需佩戴防护用具，终止液具腐蚀性。
性能参数
灵敏度：<10 pg/mL
检测范围：31.25–2,000 pg/mL
批内变异系数：<10%，批间<15%。
有效期
6个月（见外包装标签）。
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