商品属性
产品名称 | 人阴离子/糖转运蛋白(AST)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human AST ELISA Kit |
检测范围 | 0.312ng/mL-20ng/mL | 货号 | PH32961 |
产品概述
本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他生物样本中阴离子/糖转运蛋白(AST)的浓度。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),具有高灵敏度和特异性,适用于科研及临床研究。
试剂盒组成
预包被微孔板:96孔或48孔(根据规格选择),包被抗AST抗体。
标准品:系列浓度AST标准溶液(冻干或液体)。
检测抗体:生物素标记的抗AST抗体。
酶结合物:辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素。
显色底物:TMB(四甲基联苯胺)。
终止液:2M硫酸溶液。
洗涤缓冲液:20×浓缩液,需稀释使用。
样本稀释液:用于样本预处理。


检测原理
采用双抗体夹心法:样本中的AST与预包被抗体结合,再与生物素标记的检测抗体及HRP酶结合物反应,通过TMB显色。显色强度与AST浓度成正比,通过酶标仪测定吸光度(450nm)并计算浓度。
样本要求
血清/血浆:采集后离心去除颗粒物,-20℃保存避免反复冻融。
细胞培养上清:离心去除沉淀,立即检测或分装冻存。
其他体液:需验证样本兼容性。
操作步骤
标准品稀释:按说明书梯度稀释。
加样:标准品及样本加入微孔板,37℃孵育1-2小时。
洗涤:弃液体,洗涤缓冲液洗板3次。
加检测抗体:37℃孵育1小时。
加酶结合物:37℃避光反应30分钟。
显色:加入TMB底物,避光反应15-30分钟。
终止:加入终止液,酶标仪读取OD450nm。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过曲线方程计算样本浓度。
注意事项
试剂盒需在2-8℃保存,避免反复冻融标准品或酶结合物。
不同批次试剂不可混用。
显色时间需严格控制,避免过度反应。
实验废弃物需按生物危害规范处理。
性能参数
检测范围:通常为0.1-100 ng/mL。
灵敏度:≤0.05 ng/mL。
批内/批间差异:CV<10%。
常见问题
反应时间差异:由抗体亲和力及实验设计决定,高亲和力抗体可缩短孵育时间。
抗体稳定性:稀释后需分装保存于-20℃,避免反复冻融。
批间差异控制:建议使用同一批次试剂,并严格标准化操作流程。
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关键字: 人阴离子/糖转运蛋白;AST;ELISA试剂盒;
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