1. 试剂盒概述
检测目标:人白细胞介素12p40(Interleukin-12 p40,IL-12p40),是IL-12和IL-23的共同亚基,参与Th1细胞免疫应答调控。
检测原理:双抗体夹心ELISA(Sandwich ELISA),特异性识别人IL-12p40单体或二聚体形式。
样本类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆液等。
产品名称
人白介素12p40(IL-12p40)elisa试剂盒
货号
XG-H1708
英文名称
Human IL-12p40 ELISA Kit
规格
48T\96T
2. 试剂盒组成
组分 说明
预包被微孔板 抗人IL-12p40单抗包被的96孔板
重组标准品 人IL-12p40(0-1000 pg/mL梯度)
检测抗体 生物素化抗人IL-12p40二抗
酶结合物 链霉亲和素-HRP
TMB显色液 HRP底物溶液
终止液 1M硫酸溶液
洗涤缓冲液 20×浓缩PBS-Tween
样本稀释液 含蛋白稳定剂的缓冲液
3. 检测原理
捕获:样本中IL-12p40与板载抗体结合
标记:加入生物素化检测抗体形成复合物
放大:链霉亲和素-HRP与生物素结合
显色:TMB在HRP催化下显蓝色(终止后变黄)
定量:450nm测OD值,标准曲线计算浓度
4. 主要应用
免疫学研究:Th1/Th2平衡调控机制
感染性疾病:结核、HIV等病原体免疫应答
自身免疫病:银屑病、多发性硬化症研究
肿瘤免疫:评估免疫检查点治疗疗效
5. 性能参数
参数 指标
检测范围 15.6-1000 pg/mL
最低检测限 4.7 pg/mL
板内变异系数 <8%
板间变异系数 <10%
回收率 85-115%
交叉反应 不与IL-12p70/IL-23交叉
6. 实验流程
样本准备:
血清:室温凝固30min后,1000×g离心15min
细胞上清:离心去除细胞碎片
标准品稀释:按0-1000 pg/mL梯度配制
加样孵育:100μL/孔,37℃ 2h
洗板:自动洗板机洗5次
显色检测:按说明书加入各试剂
7. 数据分析
推荐使用四参数逻辑(4PL)拟合标准曲线
典型标准曲线特征:
R2值应>0.99
ED80浓度约200pg/mL
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