检测原理
双抗体夹心ELISA法。包被抗大鼠CCL11抗体捕获样本中的Eotaxin,加入生物素标记检测抗体与HRP标记链霉亲和素,通过TMB显色,测定OD450nm吸光度值,计算浓度。
产品名称
大鼠Eotaxin/CCL11elisa试剂盒
英文名称
RatEotaxin/CCL11 ELISA Kit
分类
Rat/大鼠Elisa试剂盒
检测范围
灵敏度
货号
PR33606
试剂盒组成
预包被微孔板:96孔(8×12)
标准品(冻干粉):0.5 ng/管 ×6(需用标准品稀释液复溶)
检测抗体:生物素标记抗大鼠CCL11抗体(1:100稀释)
HRP-链霉亲和素(1:100稀释)
TMB底物溶液:10 mL
终止液:2M H₂SO₄ 10 mL
洗涤缓冲液(10×):50 mL(需1:10稀释)
样本稀释液:30 mL
操作步骤
标准品稀释:梯度稀释至1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6 pg/mL。
加样:标准品/样本100 μL/孔,37℃孵育2小时。
洗板:洗涤液洗3次。
加检测抗体:100 μL/孔,37℃孵育1小时。
加HRP-链霉亲和素:100 μL/孔,避光孵育30分钟。
显色:加TMB 90 μL/孔,避光反应15分钟。
终止:加终止液50 μL/孔。
检测:450 nm波长读取OD值。
数据处理
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线。
通过曲线方程计算样本浓度(建议使用四参数拟合软件)。
注意事项
避免反复冻融样本,离心去除沉淀。
终止后30分钟内完成检测。
不同批号试剂不可混用。
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