检测原理

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。预先包被小鼠抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)捕获抗体的微孔板中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经温育和洗涤后,通过TMB底物显色。显色强度与样本中AT-Ⅲ浓度呈正相关,使用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度(OD值)并计算浓度。
产品名称 | 小鼠Antithrombin Ⅲelisa试剂盒 | 英文名称 | Mouse Antithrombin Ⅲ ELISA Kit |
分类 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 |
|
灵敏度 |
| 货号 | PM33636 |

样本处理与保存

血清:采集血液后,3000 rpm离心10分钟分离血清,避免溶血或反复冻融。
血浆:建议使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000 rpm离心30分钟取上清。
保存:短期可存于2–8℃,长期需分装后-20℃以下保存,避免反复冻融。
性能参数

灵敏度:检测下限≤10 pg/mL。
准确性:标准品线性回归相关系数R²≥0.990。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均<15%。
操作步骤

包被:用碳酸盐缓冲液(pH 9.6)稀释捕获抗体至1–10 μg/mL,每孔加100 μL,4℃过夜后洗涤。
加样:加入待测样本或标准品100 μL/孔,37℃孵育1小时,洗涤。
酶标抗体:加入HRP标记检测抗体100 μL/孔,37℃孵育30–60分钟,洗涤。
显色:加入TMB底物100 μL/孔,37℃避光显色10–30分钟,终止后测定OD值。
注意事项

实验需设空白孔、阴性及阳性对照,建议样本做双复孔。
酶标板开封后未用完需密封干燥保存。
避免使用溶血、脂血或细菌污染样本;浑浊样本需离心澄清后检测。
显色时间可根据颜色深浅调整,终止后需立即读数。
储存条件
试剂盒保存于2–8℃,有效期见外包装。
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关键字: 小鼠;Antithrombin Ⅲ;ELISA试剂盒;