产品名称
小鼠FGF-1/FGF acidacelisa试剂盒
英文名称
Mouse FGF-1/FGF acidac ELISA Kit
分类
Mouse/小鼠Elisa试剂盒
检测范围
灵敏度
货号
PM33648
背景说明:
aFGF-1(FGF acidic/FGF-1)是一种分泌型有丝分裂原,可刺激多种细胞增殖,参与发育、再生和血管生成过程。
其通过核定位信号进入细胞核,并在细胞内发挥抑制p53活性的抗凋亡作用 。
检测原理
采用双抗体夹心法:
特异性抗体预包被于96孔板;
加入样本/标准品,目标蛋白(aFGF-1)与固相抗体结合;
加入HRP标记的检测抗体形成复合物;
洗涤后加入TMB底物显色(蓝色→黄色);
450nm波长测定OD值,浓度与吸光度正相关 。
操作步骤(关键流程)
试剂准备:
室温平衡30分钟,20×洗涤液用蒸馏水稀释至工作浓度。
加样:
标准品孔:加50μL标准品。
样本孔:10μL样本 + 40μL稀释液(5倍稀释)。
空白孔:不加样。
首次温育:37℃孵育30分钟。
洗涤:弃液→拍干→加洗涤液静置1分钟→重复洗板4次。
加酶标工作液:每孔50μL(空白孔除外)。
二次温育:37℃孵育30分钟。
二次洗涤:同步骤4。
显色:
每孔依次加显色剂A、B液各50μL;
37℃避光显色15分钟。
终止反应:每孔加50μL终止液(蓝色立转黄色)。
注意事项
样本稀释:样本需按说明稀释,避免浓度超出检测范围。
洗涤操作:彻底洗涤可降低背景值,确保结果准确性。
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